响应面法优化Aspergillus niger X-6发酵生产菊粉酶工艺的研究

为提高Aspergillus niger X-6 发酵生产菊粉酶的产率,运用Plackett-Burmen 方法对麸皮、菊粉、蛋白胨、酵母膏添加量和发酵时间、温度、pH 值、接种量8 个影响因素进行考察,筛选出麸皮添加量、发酵时间和pH值为3 个显著影响因素,然后采用Box-Behnken 中心组合和响应面法对上述3 个因素进行产酶条件的进一步优化,建立菊粉酶产率的二次多项式数学模型,并分析模型的有效性与因子间的交互作用。结果表明：黑曲霉发酵产菊粉酶的优化工艺参数为：麸皮添加量4.64%、发酵时间81.5h、pH6.0。在此条件下,产酶活力达20.42U/mL,与优化前相比提高了30.81%。     

混菌固态发酵麸皮制备蛋白饲料的研究

从4株酵母菌中筛选出一株在麸皮培养基中合成蛋白能力较高的酵母菌,然后,利用酵母菌Ⅱ与高产纤维素酶活菌株黑曲霉Ⅰ之间的协同效应,以麸皮为底物,混菌固态发酵生产蛋白饲料.通过单因素和正交试验优化发酵条件.结果表明,培养温度30℃、接菌量l0%、接菌比酵母菌Ⅱ:黑曲霉Ⅰ (2:1)、水料比(1:1)、葡萄糖添加量2%,发酵产物中粗蛋白含量为25.26%,比麸皮发酵前粗蛋白含量提高了33.93%.     

乳酸菌发酵甘草溶液工艺优化研究

采应用单因素和正交试验优化了乳酸菌发酵甘草溶液工艺参数。试验结果表明,乳酸菌发酵甘草溶液的最佳工艺条件:底物浓度10%、乳酸菌添加量1.5%、葡糖糖添加量3%、大豆蛋白质添加量4%、发酵温度40℃、发酵时间20 h。在该条件下,p H为3.67。     

甘草生物转化菌种选育

通过初筛、复筛、分离纯化出甘草生物转化菌,经过形态鉴定,有根霉、青霉、米曲霉、黑曲霉.用筛选到的霉菌对甘草煮提液、甘草酸进行液体发酵转化,HPLC检测,结果表明甘草酸经米曲霉、黑曲霉生物转化后,甘草酸波峰变小,有甘草次酸产生.     

橡胶籽粕黑曲霉固态发酵脱氰研究

利用黑曲霉固态发酵降解橡胶籽粕中的亚麻苦苷脱氰。在单因素试验的基础上,以发酵时间、发酵温度和麸皮添加量为自变量,以氰脱除率为响应值,进行橡胶籽粕黑曲霉固态发酵脱氰响应面优化试验。得到的最佳脱氰工艺条件为：发酵时间82 h,发酵温度30.5℃,麸皮添加量11 g（10 g橡胶籽粕）。在最佳条件下,氰的脱除率为94.30%,经发酵的橡胶籽粕氰含量由3.7 mg/kg降至0.211 mg/kg。     

黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸工艺优化及其抑菌活性初探

本文对黑曲霉发酵麸皮产木聚糖酶、阿魏酸酯酶活性与产总阿魏酸量的相关性进行研究，运用Box-Behnken实验及响应面分析，对麸皮培养基配方进行优化，提取黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸，并检测其抑菌效果。实验结果显示，木聚糖酶和阿魏酸酯酶活性与麸皮总阿魏酸释放量呈正相关。黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸工艺参数优化组合为：麸皮10 g，料液比为1：1.4，麦芽糖、尿素、磷酸二氢钾在所加溶液中的浓度分别为6.42 g/L、2.00 g/L、0.11 g/L，黑曲霉种子液接种量为1.0 mL，30℃发酵96 h，麸皮总阿魏酸释放量为2.72 mg/g。以75%乙醇为溶剂，黑曲霉发酵麸皮产总阿魏酸提取量最大，为2.92 mg/g。用80%、75%乙醇提取的总阿魏酸分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳。     

益生菌发酵苹果汁工艺优化及有机酸的变化

以红富士苹果为原料,进行乳酸菌发酵苹果汁工艺条件优化并分析发酵期间苹果汁有机酸的变化。选择Lactobacillus paracasei 20241、Bifidobacterium animalis 6165、Streptococcus thermophilus 6063和Lactobacillus acidophilus 6005混合发酵苹果汁,以活菌数和感官评分为主要指标,在单因素试验基础上进行响应面优化试验,研究不同的菌种比例、接种量、发酵时间等对苹果汁活菌数和感官评分的影响。结果表明,乳酸菌发酵苹果汁的优化工艺条件为菌种比例1∶1∶1∶1、接种量2%、发酵时间24 h、发酵温度37℃,在此条件下得到的活菌数为1.985×108 CFU/mL,感官评分为80.23分。采用最佳工艺条件发酵苹果汁,利用高效液相色谱法对发酵过程中苹果汁有机酸的变化情况进行分析,结果表明:经过发酵后,苹果酸和琥珀酸含量下降明显(P0.05),而乳酸、奎宁酸、柠檬酸、酒石酸、丙酮酸和莽草酸含量均显著提高(P0.05)。     

利用浓缩苹果汁生产苹果干酒工艺研究

以浓缩苹果汁为原料,利用单因素实验和正交实验对全汁型苹果干酒的发酵条件进行了优化.同时研究了不同发酵条件下,苹果汁中的糖、酸、酒精度的变化趋势.结果表明:利用浓缩苹果汁酿制苹果干酒的最佳工艺条件为:温度20℃、酸度pH3.6、糖度23％、酵母菌种为活性干酵母.在此条件下发酵得到的产品,其感官评定平均分数达到92.5分.     

响应面法优化芝麻粕发酵制备芝麻多肽的研究

以芝麻粕为原料,选用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母和黑曲霉为发酵菌种,通过固态发酵确定了生产芝麻多肽的最优二元复合菌及其配比。采用Plackett-Burma试验筛选出了对最优组合菌种发酵生产芝麻多肽有显著影响的因素,即发酵温度、发酵时间和接种量。用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,并运用三因素三水平响应面试验对最优组合菌种发酵生产芝麻多肽的工艺条件进行了优化。结果表明,芝麻粕固态发酵的最佳条件为:培养基含水量30%,麸皮含量10%,黑曲霉和啤酒酵母接种比例1∶1,接种量19.69%,发酵温度34.50℃,发酵时间36.11 h。在此条件下,芝麻多肽含量为7.12%。     

多菌种分步固态发酵果渣生产菌体蛋白饲料的工艺优化

实验研究了多菌种分步固态发酵果渣生产菌体蛋白饲料的工艺条件,以果渣为主要原料,麸皮、豆粕、谷糠等为辅料,通过对多菌种(黑曲霉、产朊假丝酵母、热带假丝酵母和酿酒酵母)接种及培养方法、菌液的接种量、发酵的最佳温度、共发酵时间、固液比及物料酸碱度因素的优化研究,获得了优化后的多菌种分步固态发酵果渣生产菌体蛋白饲料生产工艺。通过单因素试验及正交试验,确定最佳发酵条件为固液比60%,初始pH5.5,温度30℃,黑曲霉的接种量为7.50%,复合酵母液的接种量为10%,黑曲霉在发酵初期接入,复合酵母液在发酵24h后接入,共培养时间为72h。在最佳菌种配比和发酵条件下,发酵终产物的粗蛋白质含量从4.97%增加至27.60%,增长了22.63个百分点,达到优质蛋白饲料标准。     

苹果渣饲料中展青霉素生物脱除的条件优化及脱除前后饲料中营养物质评价

为降低苹果渣中展青霉素的含量,以一株对展青霉素有降解能力的黑曲霉FS10为发酵菌株对展青霉素污染的苹果渣进行发酵脱毒。以展青霉素降解率为指标,通过单因素实验对接种量、料水比、发酵时间和发酵温度四个影响苹果渣固态发酵的因素参数进行优化,然后利用响应面法筛选最优发酵条件,并对最优发酵条件下苹果渣发酵产物的营养物质进行评价。结果表明,接种量10%,发酵温度31 oC,发酵时间4 d,料水比1:3.2（g:mL）为黑曲霉生物发酵苹果渣的最优发酵条件,在此条件下展青霉素可被完全脱除。该验证结果与理论值相对误差为1.67%,说明该优化参数可行,具有实际应用价值。相较于发酵前而言,发酵后苹果渣中粗纤维含量从20.26%降低17.32%,粗蛋白含量从 8.16% 提高至10.08%,粗脂肪含量从3.32%提高至4.06%,总氨基酸含量从64.43 mg /g提高至73.78 mg/g。该研究不仅能够完全脱除受污染苹果渣中的展青霉素,还可有效改善苹果渣的营养价值,为开发安全营养的苹果渣饲料提供了有力的技术支持。     

黑曲霉发酵副产物中营养成分分析

为了再利用黑曲霉发酵生产阿魏酸酯酶和阿拉伯木聚糖酶的副产物,通过评价麦麸、玉米麸皮和蔗渣发酵副产物的营养价值,从而探讨它们作为饲料的可行性。研究了硝酸钠、硫酸铵和碳酸铵等氮源对黑曲霉固体发酵所得的水提液和残渣中的可溶性固形物、阿魏酸、低聚糖、氨基态氮、核黄素和蛋白质含量的影响。结果表明,黑曲霉在以麦麸为原料的培养基上生长良好,且以硝酸钠为无机氮源发酵所得水提液的营养价值最佳,但蛋白质含量却比未发酵麦麸减少了36%。另外,蔗渣发酵后其核黄素和蛋白质含量却大大增加,分别是原料的50倍和2.5倍,但在玉米麸皮发酵产物中增加的幅度不大。     

果胶酶生产及其在苹果汁澄清中的应用

对黑曲霉(Aspergillus niger)LLW-1菌株固态发酵生产酸性果胶酶的发酵培养基组成和发酵条件以及利用果胶酶澄清苹果汁的工艺条件进行了研究。固态发酵产酶条件为:250 mL三角瓶装10 g基料(豆饼∶麸皮=2.0 g∶8.0 g),(NH4)2SO420 g/kg,Tween-80 1.5 g/kg,玉米浆50 mL/kg,KH2PO43.0 g/kg,CaCl21.0 g/kg,MgSO4.7H2O 1.0 g/kg(均相对于基料),料水比1∶1.2,自然pH;31℃静置培养72 h,期间在为24 h翻曲1次,果胶酶活力达2 418 IU/g(干曲)。酸性果胶酶澄清苹果汁的工艺条件为:果汁自然pH值,果胶酶用量500IU/L(果汁),明胶添加量0.05 g/L(果汁),酶解温度和时间分别为45℃和1 h。     

产柚苷酶黑曲霉SL2K发酵条件优化

该研究以黑曲霉（Aspergillus niger）SL2K为研究对象,对其产柚苷酶的液态发酵条件进行优化。 通过单因素试验对碳源、氮 源、诱导物、接种量、初始pH值和培养时间进行考查,在单因素基础上,选取麸皮粉添加量、蛋白胨添加量、接种量、初始pH值4个因素 进行4水平正交试验优化。 结果表明,优化后的产酶发酵条件为麸皮粉添加量3%,蛋白胨添加量5%,接种量8%,初始pH值为5.0,鼠李 糖0.08%、KH2PO4 1 g/L,KCl 0.5 g/L,MgSO·4 7H2O 0.5 g/L,FeSO4 0.01 g/L,装液量为100 mL/250 mL,摇床转速180 r/min,培养温度28 ℃, 培养时间96 h。 在此优化条件下,柚苷酶活力为233.89 U/mL,是优化前的2.13倍。     

生物发酵麦麸脱除赭曲霉毒素A的条件优化及发酵前后挥发性风味物质的评价

将一株对赭曲霉毒素A（Ochratoxin A, OTA）有明显脱除效果的黑曲霉菌株FS-UV-21作为发酵菌株,对被OTA污染的麦麸进行发酵脱毒。以OTA的脱除率为指标,研究发酵时间、温度、接种量及料液比四个因素对OTA脱除效果的影响,并利用响应面法优化麦麸固态发酵的参数。同时在最佳发酵条件下,分析评价麦麸发酵前后的挥发性风味物质。结果显示,在接种量15%,发酵温度32 oC,发酵时间5 d,料水比 1:3.3 g/mL条件下,进行黑曲霉生物发酵麦麸实验可得到OTA脱除率最高为60.89%,相比理论值误差为2.65%,说明该优化的条件参数可行,存在一定的实际应用价值。通过顶空固相微萃取-气质联用技术研究了麦麸发酵前后的挥发性物质,发现发酵后挥发性化合物明显增加,包括多种具有独特香味的物质,例如壬醇、香兰素等。该研究为麦麸的安全利用提供了技术支持。     

复合杂粕多菌种发酵工艺研究

以枯草芽孢杆菌、黑曲霉和酿酒酵母为出发菌株,通过对固态发酵工艺条件的优化,获得复合菌种固态发酵生产蛋白质饲料的最佳工艺参数。结果表明:以棉籽粕45%、菜籽粕15%、玉米酒精糟15%、麸皮21%和硫酸铵2%为发酵基质,枯草芽孢杆菌∶酿酒酵母∶黑曲霉为2∶1∶1、接种量12%、发酵基质初始含水率45%、发酵温度34℃和发酵时间60h为发酵条件,发酵后粗蛋白质达42.5%,比发酵前提高15.5%;游离棉酚从1 240mg/kg降至360mg/kg,脱毒率达71%;粗纤维含量下降。     

正交法优化酸性植酸酶固态发酵工艺

以麸皮为基本原料,对黑曲霉TW012 产酸性植酸酶的固态发酵条件进行优化,以提高酸性植酸酶的产量。依据单因素试验和正交试验确定酸性植酸酶固态发酵的最佳工艺条件为：氮源(NH4)2SO4 质量分数1.6%、pH5.0、含水量70%、30℃发酵5d,此时酸性植酸酶的酶活力可达346.576U/g 干基,较优化前提高23.77%。     

黑曲霉固态发酵产羧肽酶条件优化及在酱油酿造中的应用

该研究以羧肽酶活力为考察指标,采用响应面法对1株高产羧肽酶的黑曲霉（Aspergillus niger）H1-6固态发酵产酶条件进行优化。首先采用单因素试验结合Plackett-Burman（PB）试验筛选出重要影响因子：麸皮添加量、水分含量和接种量,通过最陡爬坡试验获得重要影响因子的峰值范围,最后采用Box-Behnken试验、响应面分析对重要影响因子进行优化。结果表明,黑曲霉H1-6的最优产酶培养条件为：麸皮添加量36%、豆粕添加量50%、NaCl添加量10%、pH值为6.0、含水量56.6%,接种量1.3%。在此优化条件下,固态发酵羧肽酶的酶活力达到938.33 mU/g。将该羧肽酶粗酶液添加到酱油酿造中,能有效提高酱油中氨基态氮的含量（达到1.38 g/100 mL）,进而提高其鲜味。     

高产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其固态发酵的研究

从自然界中采集土壤样本,使用阿魏酸乙酯为唯一碳源的选择性培养基;进行初筛、固态发酵产酶试验、复筛得到1株高产阿魏酸酯酶的菌株,通过形态学观察鉴定为黑曲霉。对该菌株固态发酵产阿魏酸酯酶的培养条件进行了研究,单因素实验结果表明,相同汽爆条件下汽爆稻草的发酵产酶酶活较高;在固液比1∶3、初始pH3、麸皮添加量25%、30℃下发酵3d后酶活最高,可达445.1mU/g。