冷却肉中高铁肌红蛋白还原酶的特性及其与肉色泽稳定性之间的关系研究

以冷却牛肉为实验材料,对冷却牛肉中高铁肌红蛋白还原酶与肉色泽稳定性之间的关系以及高铁肌红蛋白还原酶的还原条件和还原途径进行了探讨.研究发现,高铁肌红蛋白还原酶活性越高,肉的色泽也越稳定.高铁肌红蛋白还原酶在体内作用时是NADH依赖性的并且需要细胞色素b5作为其电子转移激活剂,其在体外作用时必须有亚铁氰化钾参与下才可起到还原作用.该酶的最适pH为6.5,最适作用温度25℃,但在pH6.0,温度10℃时仍有相当的活性.     

牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶的分离及其酶学性质

以冷鲜牛背最长肌为原料,采用硫酸铵盐析、超滤法对原料肉中的高铁肌红蛋白还原酶进行粗分离,并研究温度、pH、金属离子对高铁肌红蛋白还原酶活性的影响。结果表明:在硫酸铵饱和度65%,超滤(>50kDa)条件下,牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶可得到分离与纯化。试验范围内,牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶的分子量为29.0~66.4kDa,适宜温度为40℃,pH为6.0,Cu2+可明显抑制牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶活性。     

冷鲜牛肉高铁肌红蛋白还原酶的粗分离与性质

以不同部位冷鲜牛肉(背最长肌、腰大肌)为原料,采用硫酸铵盐析法对其高铁肌红蛋白还原酶(Met Mb R)进行粗分离,并对分离所得酶液的适宜温度及p H进行研究,旨在为提高冷鲜牛肉的肉色稳定性奠定基础。结果表明,原料冷鲜牛背最长肌和牛腰大肌粗酶液的分子量主要范围均为14.3～97.2 k Da。原料冷鲜牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶酶活为94.33 U/m L,在70%硫酸铵饱和度下可主要沉淀得高铁肌红蛋白还原酶,从而达到粗分离的目的。粗分离所得的牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶适宜温度30～45℃,适宜p H 6.5。原料冷鲜牛腰大肌高铁肌红蛋白还原酶酶活为53.60 U/m L,在70%硫酸铵饱和度下可主要沉淀得高铁肌红蛋白还原酶,从而达到粗分离的目的。粗分离所得的牛腰大肌高铁肌红蛋白还原酶适宜温度35℃,适宜p H 6.0～6.5。     

高铁肌红蛋白还原酶与肉色关系研究进展

高铁肌红蛋白还原酶是肌肉中存在的可以还原高铁肌红蛋白的一类酶,它与肉色的关系是国内外研究的热点课题.本文对高铁肌红蛋白还原酶以及肉色稳定性关系的国外研究现状进行了概括,包括高铁肌红蛋白还原酶的概述、酶活力的测定方法、影响酶活力的因素、酶纯化的研究、还原过程的机理研究、酶活力和肉色稳定性关系等内容.最后分析了高铁肌红蛋白还原酶在肉品护色领域的研究所面临的问题,从而为以后的研究提供一些新的思路.     

贮藏时间、温度以及提取方法对高铁肌红蛋白还原酶活力的影响

高铁肌红蛋白还原酶是和肉色相关的一类酶,它可以阻抗引起肉品褐变的高铁肌红蛋白的生成,从而延长肉品货架期.为了更好地了解它的特性,本文研究了贮藏时间、温度以及提取方法对高铁肌红蛋白还原酶活力的影响,以及酶活力和高铁肌红蛋白相对含量的相关性.实验结果显示,经过高铁氰化钾氧化但不经硫酸铵盐析的二号样活力最高,在30℃的贮藏条件下其活力比4℃时高,在贮藏9-15d时酶活力和高铁肌红蛋白相对百分含量呈负相关.     

牦牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶提取工艺的优化

为研究牦牛背最长肌高铁肌红蛋白还原酶的最佳提取条件,本实验以牦牛背最长肌为研究对象,以高铁肌红蛋白还原酶活力为考察指标,在单因素试验的基础上,采用响应曲面分析法,以高铁肌红蛋白还原酶活力为响应值,对磷酸盐缓冲液、Tris-HCl和柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液3 种提取液的pH值、浓度和料液比3 个因素进行优化。结果表明：各因素对酶活力的影响大小顺序依次为提取液的pH值＞料液比＞浓度;最佳提取参数为磷酸盐缓冲液pH 7.22、料液比1∶2.25（m/V）、浓度2.12 mmol/L,在此条件下酶活力为73.92 U/L,与理论预测值的相对误差为0.86%,说明本实验所建立的模型在实践中具有可行性。     

超高压对高铁肌红蛋白还原酶活性及二级结构的影响

本文研究了超高压处理对高铁肌红蛋白还原酶活性的影响,测定其圆二色光谱,分析酶的二级结构与酶活性的关系。试验压力0.1~300 MPa,温度5~55℃。此外,考察了不同p H值(5.5~7.5)和保压时间(5~30 min)超高压处理对酶活性的影响。试验结果表明:(1)在处理温度10℃,保压时间10 min和酶溶液p H 6.5的条件下,200 MPa以下压力范围处理酶被激活,并在200 MPa时活性表现最高;在200~300 MPa时,酶活性基本保持稳定。(2)高压处理时,温度低于25℃对酶活性影响不大;超过25℃后,酶活性随温度升高而下降迅速。(3)保压时间超过10 min后,延长保压时间对酶的活性影响甚微。(4)当p H值为6.5时,酶的活性达到最高水平,酶最为耐压。(5)酶活性与α-螺旋含量密切相关;超高压处理将降低酶蛋白二级结构中的α-螺旋比例,从而使酶被激活。     

美国研究乳酸盐对体外肌红蛋白氧化还原稳定性温度与pH值依赖的影响

<正>美国研究评价了乳酸盐对牛肉、马肉、猪肉以及羊肉肌红蛋白的体外氧化还原稳定性和热稳定性的影响(拟发表于2014年1月Meat Science)。在生理指标为pH7.4、37℃和肉品指标pH5.6、4℃条件下,200mmol/L乳酸盐对氧化还原稳定性无显著影响(P>0.05)。然而,在模拟活体骨骼肌紧张(pH6.5、37℃)的情况下,乳酸盐增加了高铁肌红蛋白的形成(P<0.05)。在紧张骨骼肌和肉品不同条件下,肌红蛋白的氧化还原稳定性是根据肉的种类不同而有差异的(P<0.05)。在71℃条件下,与空白对照组相比,肌红蛋白在乳酸盐存在的条件下热稳定性降     

嗜热古菌Thermococcus sp.HJ21产高温普鲁兰酶条件和酶学性质

对一株分离自热液口的超嗜热古菌(Thermococcus sp. HJ21)菌株产普鲁兰酶的条件及酶学性质进行了研究.结果发现:该菌株在18 h产酶量达到最高.在发酵温度为88 ℃、培养基初始pH 6.5,以及NaCl质量浓度为2.5 g/dL时,产酶较高.麦芽糖、酵母粉和蛋白胨有利于普鲁兰酶的产生.该酶的最适作用温度为95 ℃,在80～100 ℃之间仍可保持较高的酶活性;该酶具有较好的热稳定性,100 ℃保温2 h,仍有50%以上的残余酶活.该酶的最适作用pH为6.0,并且在pH 5.0～7.0之间可以保持较高酶活性;在pH 5.0～7.0之间较稳定,在pH 6.5时稳定性最好.Ca2+和Na+对普鲁兰酶具有较强的激活作用,而Al3+、Ni2+、Hg2+、Cu2+等则强烈抑制酶的活性.     

来自基因工程菌E.coli BL21/pET-DsbA-MalQ的麦芽糖转糖基酶的分离纯化及酶学性质研究

通过6-His的分离标签,联合采取硫酸铵沉淀,生物半透膜透析和亲和层析等方法,纯化了目标酶。通过使用凝血酶切割DsbA-MalQ融合蛋白,证明酶切后酶蛋白仍具有麦芽糖转糖基酶活性。该酶的最适温度为37℃,最适pH值为6.5。当处理温度小于40℃时,酶的活力基本保持在最高活性的80%以上,相对稳定;在酶的pH耐受方面,在pH5.5～8.0范围内较稳定。金属离子和EDTA对酶活性的影响实验表明,EDTA对酶活的影响不大,但Zn2 、Cu2 、Hg2 、Ag 对酶蛋白有较强的抑制作用,而Ca2 、Mg2 、Mn2 等对表达的酶有一定的激活作用。在37℃,pH6.5时以麦芽三糖为底物测得酶促反应的Km值为0.378mmol/L,Vmax值为1.979mmol/(L·min)。     

包装方式和宰后不同时间包装对羊肉品质的影响

为探究包装方式和宰后不同时间包装对羊肉贮藏品质的影响,本研究对宰后1 h热分割羊肉和冷却成熟24 h后的分割羊肉分别进行热收缩包装、真空包装、贴体包装、50%（体积分数,下同）O2＋50% CO2气调包装,测定其在（2±2）℃贮藏过程中pH值、色泽、贮藏损失率、蒸煮损失率、离心损失率、剪切力、挥发性气味的变化。结果表明：与宰后24 h包装相比,宰后1 h包装羊肉pH值在贮藏14 d时更高,但其贮藏期间色泽较好,色泽稳定性更高,贮藏损失率更低。从整体来看,3 种真空处理（热收缩包装、真空包装、贴体包装）羊肉嫩度均优于气调包装羊肉,且宰后1 h包装时真空条件处理对羊肉嫩化效果最好,宰后24 h羊肉在贮藏前期气调包装对羊肉嫩化效果较好;而无论何时包装,热收缩包装和气调包装羊肉贮藏损失率均显著小于其他处理组（P＜0.05）,在贮藏前期色泽及稳定性较好,但贮藏后期色泽稳定性下降明显,气调包装羊肉在14 d时已部分发绿,贮藏21 d时挥发性气味变化显著。综上,宰后1 h包装有利于提高羊肉贮藏期间色泽及持水力,改善真空处理羊肉嫩度,宰后24 h包装可提高50% O2＋50% CO2气调包装羊肉贮藏前期的嫩度;其中热收缩包装和气调包装羊肉持水力高,贮藏前期色泽及稳定性好,真空包装、贴体包装羊肉品质变化相对稳定,适宜长期贮藏。     

Metmyoglobin Reducing Capacity of Fresh Normal, PSE, and DFD Pork During Retail Display

Fresh pale, soft, exudative (PSE), dark, firm, dry (DFD), and normal pork were stored under light or dark conditions at 4°C for 7 days. Sample pH, metmyoglobin reductase activity, oxygen consumption rate, and relative surface metmyoglobin and oxymyoglobin contents were determined. DFD pork had the highest metmyoglobin reductase activity and oxygen consumption rate. Enzyme activity of PSE was lower than that of normal pork, but no difference existed in oxygen consumption rate between PSE and normal samples. Metmyoglobin reductase activity dropped slowly during meat storage; oxygen consumption rate sharply decreased during the first day of storage. Both metmyoglobin reductase activity and oxygen consumption rate declined more rapidly in the light. Results can help develop guidelines for display and packaging of pork.     

啤酒酵母细胞液脱腥处理对兔肉物理化学性质的影响

以兔腿肉为研究对象,用啤酒酵母细胞液在不同条件下对其脱腥处理后,测定各项物理化学指标,考察脱腥处理效果及对兔肉物理化学性质的影响。结果表明:硫代巴比妥酸值和腥味值分别在25℃、p H 7.0、料液比1∶2(m/V)、处理50~60 min时出现最低值;挥发性盐基氮含量分别在15~30℃、p H 6.5~7.5、料液比1∶0.5~1∶2(m/V)、处理50~60 min范围内最低且变化较缓慢;色泽分别在30~40℃、p H 8.0、料液比1∶1(m/V)、处理50 min时所受影响较小;蒸煮损失率和剪切力值分别在25℃、p H 8.0、料液比1∶2.5(m/V)、处理60~70 min时最低;料液比对各项物理化学性质的影响都较小。综合各项物理化学指标的变化可以得出采用啤酒酵母细胞液对兔腿肉进行脱腥处理的最佳条件为:25℃、p H 8.0、1∶2(m/V)的料液比处理50 min。     

不同包装方式对猪背最长肌冷却成熟期间品质变化的影响

对猪背最长肌分别进行普通托盘和真空包装2种处理,研究了4℃成熟期间菌落总数、色泽、汁液流失、煮制损失、pH和乳酸含量的变化。结果表明:普通托盘包装的肉汁液流失低,L*较高,但微生物菌落总数增长较快;真空包装可有效抑制微生物菌落总数增长,但汁液流失较高、肉色L*较低。2种包装方式下猪背最长肌煮制损失没有显著差别,并且pH和乳酸在冷却成熟期间亦无显著变化。     

延边黄牛冷热鲜肉货架期的比较研究

本试验将延边黄牛外脊和臀中肌两个部位的热鲜肉和3±1℃条件下排酸24h的冷鲜肉进行托盘包装,置于3±1℃冷藏箱中贮藏。通过pH值、TVB-N值、表面颜色、菌落总数作为评价指标,研究延边黄牛冷热鲜肉的货架期。试验结果表明:经过3±1℃排酸24h冷鲜肉的货架期较热鲜肉货架期延长期3-4d,为了保证肉品质量,延边黄牛外脊和臀中肌的热鲜肉和冷鲜肉的货架期以不超过4d和8d为宜。     

茶叶用量和包装方式对卤制牦牛肉贮藏期间理化特性和微生物变化的影响

在卤制牦牛肉的卤煮过程中分别加入0.0%、0.5%或1.0%的绿茶叶，并采用普通包装或真空包装，对卤制牦牛肉在（4±1） ℃、24 d贮藏期内的理化特性和微生物变化进行研究。分别在贮藏期的1、3、6、12、24 d进行采样，测定卤制牦牛肉的蒸煮得率、pH值、色泽、嫩度、感官特性及菌落总数。结果表明：卤制牦牛肉的蒸煮得率仅与卤煮时间有关；在卤煮过程中添加茶叶会明显改变卤制牦牛肉的表面色泽；当卤煮时间为60 min，在卤煮过程中加入0.5%或1.0%茶叶或采用真空包装时，卤制牦牛肉贮藏期间的嫩度会明显提高，卤制牦牛肉的pH值、亮度值、红度值的下降速率和菌落总数的升高速率均得到抑制，总体感官评分升高，且茶叶用量为1.0%并采用真空包装的卤制牦牛肉贮藏期间的综合品质更好。     

紫外照射和温度波动对冷鲜肉肉色稳定性的影响

以不同部位冷鲜猪肉(背最长肌、后腿肉、腰大肌)为对象,研究肉样在2种贮藏条件(实际销售贮藏条件:4℃-13 h-紫外照射,0℃-11 h-避光;实验室设置条件:4℃-24 h-紫外照射)下色泽、肌红蛋白含量、高铁肌红蛋白还原酶活等的变化,旨在为提高冷鲜肉在销售贮藏期间的肉色稳定性提供依据。结果表明:实验室条件下,3个部位(背最长肌、后腿肉、腰大肌)冷鲜猪肉的色泽感官评定、a*值、氧合肌红蛋白含量和高铁肌红蛋白还原酶活性等均显著优于实际销售条件(P<0.05),实验室条件下更利于不同部位冷鲜猪肉的贮存。另外,在实验室条件下,3个部位中猪背最长肌肉色最稳定,其次是后腿肉,腰大肌肉色稳定性最差。     

托盘和真空包装对冷却猪肉中MetMb还原活性的影响

在冷却肉的贮藏过程中,其肌红蛋白(Mb)被氧化为高铁肌红蛋白(MetMb),导致了冷却肉的褐变。研究了托盘包装和真空包装条件下,冷却肉自身的还原系统活性变化规律及其对肉色稳定性的影响。在2周的贮藏期内,真空与托盘包装冷却肉糜肌浆蛋白粗提液的还原活性持续下降;但真空包装组MetMb还原酶粗提液还原活力第1天到第14天活性差异不显著,托盘包装组前后差异显著。真空包装组在贮藏期间MetMb含量持续下降,但托盘包装组MetMb含量则持续上升,说明无氧条件有利于MetMb的还原。托盘包装组TBA在贮藏期间持续上生,但真空包装组TBA变化不明显。结果表明,托盘包装不利于冷却肉自身MetMb还原能力的维持,而真空包装的无氧环境,有利于MetMb的还原和肉色的保持。     

喷淋减菌及包装材料对冷鲜牦牛肉品质的影响

选取牦牛背腰最长肌为原料，采用热水（82～87 ℃）结合体积分数5%乳酸进行喷淋处理，并分别用热缩袋和纹路袋进行真空包装，然后置于4 ℃冷藏，分析冷藏期间（2、5、12、23、40 d）牦牛肉的品质变化。结果表明：热水结合乳酸喷淋降低了牦牛肉的pH值，抑制糖原酵解，延缓脂肪氧化，有效减少冷鲜牦牛肉中的菌落总数（P＜0.05），延缓冷鲜牦牛肉的腐败变质；真空热缩包装和真空纹路包装对牦牛肉蒸煮损失率、剪切力、pH值、脂肪氧化、菌落总数及总挥发性盐基氮含量有一定影响，真空热缩包装牦牛肉剪切力小于真空纹路包装，说明真空热缩包装的牦牛肉更嫩，此外，真空热缩包装牦牛肉的色泽变化更为稳定。因此，喷淋减菌结合真空热缩袋包装对延长冷鲜牦牛肉货架期的效果更为显著。     

Effects of Metmyoglobin Reducing Activity and Thermal Stability of NADH‐Dependent Reductase and Lactate Dehydrogenase on Premature Browning in Ground Beef

Premature browning is a condition wherein ground beef exhibits a well‐done appearance before reaching the USDA recommended internal cooked meat temperature of 71.1 °C; however, the mechanism is unclear. The objectives of this study were: (1) to determine the effects of packaging and temperature on metmyoglobin reducing activity (MRA) of cooked ground beef patties and (2) to assess the effects of temperature and pH on thermal stability of NADH‐dependent reductase, lactate dehydrogenase (LDH), and oxymyoglobin (OxyMb) in‐vitro. Beef patties (lean: fat = 85:15) were packaged in high‐oxygen modified atmosphere (HiOX‐MAP) or vacuum (VP) and cooked to either 65 or 71 °C. Internal meat color and MRA of both raw and cooked patties were determined. Purified NADH‐dependent reductase and LDH were used to determine the effects of pH and temperature on enzyme activity. MRA of cooked patties was temperature and packaging dependent (P < 0.05). Vacuum packaged patties cooked to 71 °C had greater (P < 0.05) MRA than HiOX‐MAP counterparts. Thermal stability of OxyMb, NADH‐dependent reductase, and LDH were different and pH‐dependent. LDH was able to generate NADH at 84 °C; whereas NADH‐dependent reductase was least stable to heat. The results suggest that patties have MRA at cooking temperatures, which can influence cooked meat color.