南瓜籽抗氧化肽的制备及分离纯化

以脱脂南瓜籽蛋白为原料,酶解制备抗氧化肽,并进行分离纯化。通过单因素试验,筛选最佳蛋白酶并考察了酶解p H、酶解温度、底物浓度、加酶量及酶解时间对水解度及DPPH自由基清除率的影响,在此基础上进行响应面试验优化酶解条件。然后采用大孔吸附树脂对南瓜籽抗氧化肽进行脱盐及分离纯化。结果表明:南瓜籽抗氧化肽的最佳酶解条件为选用碱性蛋白酶、酶解p H10.1、酶解温度52℃、底物浓度5.7%、加酶量2%、酶解时间120 min;在此条件下,20 mg/m L的南瓜籽抗氧化肽对DPPH自由基清除率为85.36%;75%乙醇溶液洗脱组分PD-3对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基的清除率及总还原力最高,洗脱组分的抗氧化性能相比粗多肽大幅提高;PD-3组分肽含量79.63%,PD-3组分77.56%相对分子质量分布在2 000以下。     

复合酶分步水解法制备汉麻多肽及其抗氧化特性研究

汉麻籽由于其营养丰富,且不含有胰蛋白酶抑制剂等抗营养因子,近年来成为食品、医药等领域的研究热点。本研究以汉麻分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶分步酶解的方式对其进行酶解,通过响应面优化酶解参数,制取汉麻多肽。并采用分光光度计测定其DPPH自由基清除率与铁还原能力,对汉麻多肽抗氧化能力进行评价。结果表明,采用先碱性蛋白酶后木瓜蛋白酶的酶解方式,制得的汉麻多肽含量最高。酶解最优条件为:第一步碱性蛋白酶水解:底物浓度为5%,酶解时间2 h,pH为8.5,酶解温度为54℃,加酶量为10100 U/g;第二步木瓜蛋白酶水解:pH为6.5,温度为50℃,加酶量为5000 U/g,酶解时间1.5 h,最终获得汉麻多肽混合物的水解度为24.48%,肽含量为8.48 mg/mL;汉麻多肽的DPPH自由基清除率为82.32%,与汉麻分离蛋白相比具有较强的铁还原能力,表明汉麻多肽具备较强的抗氧化能力。本研究为汉麻多肽的开发利用提供理论基础。     

藜麦糠抗氧化肽的超滤分离及其体外抗氧化活性

为了大批量生产抗氧化活性最好的藜麦糠抗氧化肽,采用风味酶与碱性蛋白酶组合对藜麦糠蛋白进行酶解,制备酶解液。利用超滤技术分离纯化藜麦糠抗氧化肽,并评价分离得到的不同分子质量段抗氧化肽的体外抗氧化活性,优选出抗氧化活性最好的抗氧化肽。以膜通量为指标,压力、时间和滤液质量分数为3个工艺参数,通过单因素和正交实验,探究超滤分离截留分子量为10 ku的藜麦糠抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明,不同分子量段的超滤组分具有不同的抗氧化活性,其中分子量为5~10 ku的抗氧化肽较其他分子量范围的超滤组分的抗氧化活性最好。藜麦糠抗氧化肽的最佳超滤条件为压力0.16 MPa,时间20 min,滤液质量分数2%,在此条件下得到膜通量为(41.22±0.50) L/m2·h。由此可实现5~10 ku的抗氧化肽的大量生产。     

酶解制备高得率大豆肽工艺条件优化

用Alcalage碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽.通过单因素实验研究了底物质量分数、酶解pH、酶解温度、加酶量对蛋白水解度和大豆肽得率的影响,并通过响应面分析法对酶解条件进行了优化,得出最佳条件为:底物质量分数5%,酶解pH9.5,酶解温度55℃,加酶量5 400 U/g蛋白.在此条件下,大豆分离蛋白水解度为20.16%,大豆肽得率为92.30%.     

双酶法制得米糠蛋白肽抗氧化组分的分离纯化

利用双酶法水解制得了米糠蛋白。以制得的具有生物活性的米糠蛋白多肽混合液为原料,分离纯化得到了米糠蛋白抗氧化肽,为米糠及其蛋白的深加工奠定理论基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解制备米糠蛋白肽。以DPPH·,·OH清除率为主要指标,采用不同截留分子量(1.0×10~4和3×10~3 Da)的超滤膜对米糠蛋白肽进行初步分离,获得3种不同分子质量组分,再利用SP-Sephadex C-25离子交换色谱和Sephadex G-25凝胶色谱,逐步分离纯化出单一的抗氧化肽段。采用RP-HPLC证明了分离肽段的均一性,同时分析检测出该肽段的氨基酸组成,明确肽段抗氧化活性与其氨基酸组成的关系:它是由13种氨基酸组成,其中Glu和Asp摩尔分数分别为21.46%和15.57%,还有7种人体必需氨基酸,占米糠蛋白抗氧化肽氨基酸总含量的39.2%。     

复合风味蛋白酶酶解麦麸蛋白制备麦麸抗氧化肽的研究

以麦麸蛋白为原料,复合风味蛋白酶为水解酶,探讨麦麸蛋白水解度(DH)与麦麸肽抗氧化能力的关系,并以超氧阴离子自由基(O2-·)清除率为指标,采用正交试验设计优化制备麦麸抗氧化肽的工艺条件.试验结果表明,制备麦麸抗氧化肽的最佳酶解条件为pH 5.0,加酶量为6000U/g麦麸蛋白,底物浓度5%,温度55℃,酶解7.5h,在该条件下制得的麦麸抗氧化肽清除超氧阴离子自由基的清除率可达53.70%.     

桃仁多肽的酶法制备及其抗氧化活性分析

以桃仁蛋白为原料,对响应面法优化多肽制备条件和酶解多肽各组分的抗氧化活性进行了研究。结果表明:以底物浓度3.5%、pH 10.4、加酶量4 200 U/g、酶解时间4.9 h条件下进行碱性蛋白酶酶解,可获得桃仁蛋白的最高水解度(61.12±0.7)%和多肽得率(67.91±0.5)%。桃仁蛋白及其酶解物的SDS-PAGE凝胶电泳图表明,酶解后的多肽分子质量大部分小于12 000 u。酶解液(PPH)及其超滤分离所得4组分分别采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、亚硝酸根离子清除能力和总抗氧化能力4个体外抗氧化活性测试,结果显示不同分子质量组分间的抗氧化活性存在显著性差异(P0.05),分子质量越小,其抗氧活性越强。RP-HPLC分析表明,抗氧化活性最强的P-IV组主要由9种具有一定疏水性的多肽组成。     

酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

以核桃蛋白粉为原料制备核桃蛋白抗氧化活性肽,分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的核桃多肽抗氧化活性,确定碱性蛋白酶是酶解核桃蛋白的最适蛋白酶。研究了酶解温度、酶解时间、酶解pH、底物浓度、酶添加量等酶解条件对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明:不同的酶解条件对酶解产物核桃多肽的抗氧化活性有显著影响,最佳酶解条件为:温度50℃,时间120 min,pH8,底物浓度3%,酶添加量3%,在此酶解条件下制得的核桃多肽对羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别为53.8%和50.0%,还原能力为51.7%。     

响应面法优化软枣猕猴桃蛋白水解及多肽的抗氧化研究

以酶解产物清除羟基自由基能力为指标,选用碱性蛋白酶为水解酶,利用响应曲面法优化软枣猕猴桃蛋白最佳酶解工艺条件并制取抗氧化肽。考察其水解度和清除率的相关性。结果表明：碱性蛋白酶最佳酶解工艺为温度50℃、pH9、加酶量4000U/g、酶解时间3h,此时水解度达到最大值为25.08%。在此条件下将软枣猕猴桃蛋白分别水解1、2、3、4、5h得到肽混合物进行抗氧化活性分析,得到其对羟自由基清除率分别为18.69%、24.67%、28.04%、25.82%、26.65%。当酶解时间为3h时,此时抗氧化肽的羟自由基清除率最高。     

卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。     

中华绿螂抗氧化肽的提取及其抗氧化性

利用响应面法和超滤法对中华绿螂中抗氧化肽的木瓜蛋白酶水解提取工艺条件进行优化。在单因素试验基础上,利用响应面法分析建立二次回归模型。以酶与底物浓度比值([E]/[S])、酶解温度、酶解p H和酶解时间为自变量,DPPH自由基清除率为响应值,研究各因素及其交互作用对自由基清除率的影响。根据响应曲面图及其等高线图,确认木瓜蛋白酶水解中华绿螂制备抗氧化肽的最优工艺条件:底物浓度6%、pH 4.11、酶解温度40℃、酶解时间3.09 h。在此条件下,中华绿螂抗氧化肽对DPPH自由基清除率为97.64%。所得回归模型高度显著(p<0.0001),与理论预测值基本吻合。根据超滤试验可知,超滤膜截留分子质量3000~1000 Da时抗氧化性最佳,超滤所得可溶性蛋白酶解物的抗氧化性为94.96%。     

抗氧化剂的功效及抗氧化活性的体外分析评价

本文讨论抗氧化剂在食品和体内的功效,阻止或延缓食品成分的氧化,提高机体的抗氧化剂能力及治疗某些疾病,并简要介绍了体外分析评价抗氧化抗氧化活性的方法,TRAP方法,FRAP方法和ABTs方法。     

鸡肉蛋白的酶解及其抗氧化活性研究

运用响应面(RSM)分析法对酶解鸡肉蛋白制备抗氧化肽的工艺进行优化。在单因素试验的基础上,以还原能力和超氧阴离子自由基清除率为指标,研究酶解时间、加酶量、温度对木瓜蛋白酶酶解鸡肉蛋白的酶解液抗氧化性的影响。结果表明,酶解鸡肉蛋白制备抗氧化肽的工艺条件为pH6.0、液固比2:1(mL/g)、酶解时间6.15h、加酶量1200U/g、温度51.2℃,此时还原能力达到0.802,超氧阴离子自由基清除率达到73.9%。     

Antioxidant Capacity and Antioxidant Content in Roots of 4 Sweetpotato Varieties

Abstract: The antioxidant contents (β-carotene, chlorogenic acid, and vitamin C) as well as the antioxidant capacity (ORAC, FRAP, and ABTS) of 4 sweetpotato varieties were measured in this study. The sweetpotato varieties were cultivated under different water regimes and also subjected to thermal processing. The results show that the 2 orange-fleshed varieties (Resisto and W-119) contain significant more β-carotene, chlorogenic acid, and vitamin C than the 2 cream-fleshed varieties (Bosbok and Ndou). Thermal processing decreased the carotenoid and vitamin C content of all the varieties but increased the chlorogenic acid content and antioxidant capacity. Drought stress appears to increase the β-carotene, vitamin C, and chlorogenic acid contents as well as the antioxidant capacity of some of the sweetpotato varieties, especially W-119.     

酚酸与谷胱甘肽的抗氧化活性及联合抗氧化作用

为探究谷胱甘肽与6种酚酸(丁香酸、香草酸、没食子酸、咖啡酸、芥子酸、阿魏酸)的抗氧化活性及联合抗氧化作用,以ABTS+·清除能力、DPPH·清除能力、还原力和氧自由基吸收能力为抗氧化指标,测定了谷胱甘肽与酚酸单独和联合作用的抗氧化能力,并通过协同系数(SE)分析两者是否能协同抗氧化。结果表明,在四个抗氧化实验中,酚酸的抗氧化能力均强于谷胱甘肽。谷胱甘肽与丁香酸和香草酸均存在拮抗作用,与没食子酸仅在还原力实验中有明显的协同作用(p<0.05)。谷胱甘肽与阿魏酸无协同作用,与芥子酸仅在DPPH·清除实验中存在协同。而谷胱甘肽与咖啡酸在ABTS+·、DPPH·和还原力实验中均表现出显著的协同抗氧化作用,其SE分别为1.21、2.20和1.29,为最具潜力的协同抗氧化组合。     

肉味香基中的抗氧化物质的分离及抗氧化活性

目的：对肉味香基中具有抗氧化活性的成分进行分离,探讨其结构和功能之间的关系。方法：利用膜分离和色谱分离手段对肉味香基中抗氧化成分进行分离,考察各组分对AAPH 和Fe3+/VC 诱导的卵磷脂脂质体氧化以及脂质体自动氧化的抑制效果。结果：根据分子质量将肉味香基分离得到3 个分子质量段的美拉德反应产物(MRPs),其中高分子质量MRPs(H-MRPs)抗氧化活性最强;H-MRPs 进一步分离得到H-MA、H-MB、H-MC 3类组分,极性由弱到强为：H-MA ＜ H-MB ＜ H-MC,抗氧化能力从高到低为：H-MA ＞ H-MB ＞ H-MC。结论：肉味香基中主要发挥抗氧化作用的组分是高分子质量MRPs,并且其极性越弱,抗氧化能力越强。     

茶渣蛋白抗氧化肽制备及其活性研究

以茶渣蛋白为原料,采用酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽。分别以抗氧化肽的还原力和水解度为考察指标,通过单因素实验和响应面优化酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽的制备工艺,采用超滤法对酶解液进行初步分离纯化,并考察了温度、酸碱度、金属离子、食品添加剂以及体外消化环境对分子量小于3 kDa的茶渣蛋白抗氧化肽的还原力稳定性的影响。结果表明,酶解法制备茶渣蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为底物浓度2%、酶解时间3 h、温度51 ℃、pH8.0、加酶量3034 U/g,在此条件下,茶渣抗氧化肽的还原力为0.316;当分子量小于3 kDa时,抗氧化肽的还原力为0.412,比纯化前提高了30.77%。温度从30 ℃升温至90 ℃,还原力从0.410降低至0.360;在酸碱及食品添加剂环境中仍能保持较好的还原力;在模拟消化环境中8 h后,还原力从0.412降为0.327。     

硒素对草莓果实抗氧化活性及相关物质含量的影响

该试验以草莓"章姬""红颜"为试材,叶面喷施不同浓度亚硒酸钠溶液,探究硒素对草莓果实抗氧化活性及相关物质含量的影响。结果表明:在适当浓度范围内,草莓果实中总硒、抗氧化活性和抗氧化物质含量都随着施硒浓度的升高而增加。硒浓度为20 mg/L时,总硒含量、抗氧化活性和抗氧化物质含量均达最大值,此浓度为最佳喷施浓度。     

不同处理条件对花生抗氧化肽抗氧化活性的影响

以花生蛋白粉为原料,采用Viscozyme L预水解,Alcalase水解法制备花生抗氧化肽。通过7种不同的处理条件(加热、食品添加剂、防腐剂、金属离子、杀菌、调pH值、低温)对花生抗氧化肽的4种体外抗氧化指标(清除DPPH自由基、还原力、铁离子螯合力、抗脂质体过氧化能力)进行研究。结果显示：加热处理和添加食品防腐剂有利于提高抗氧化肽的抗氧化活性;添加酒石酸、柠檬酸对抗氧化活性有较大影响,而添加氯化钠和蔗糖后对抗氧化活性影响小;添加铜离子对抗氧化活性影响较大;各种杀菌工艺有利于清除DPPH自由基、还原力、铁离子螯合力,但却降低脂质过氧化抑制率;碱性pH值条件有利于提高抗氧化肽的还原力、铁离子螯合力和脂质过氧化抑制力,酸性pH值条件不利于铁离子螯合力和脂质过氧化抑制力;低温处理降低抗氧化肽抗氧化活性。     

体外抗氧化试验筛选抗氧化肽的方法比较

为获得筛选抗氧化肽的快速、准确和重复性高的测定方法,利用具有抗氧化活性的谷胱甘肽对文献报道中常用的7种生物化学体外抗氧化实验进行筛选,对筛选后的方法在采用不同试验人员进行验证,而后对验证重复性比较好的方法再用合成的具有抗氧化活性的肽568 (Pro-Phe-Thr-Arg-Asn-Tyr-Tyr-Val-Arg-Ala-Val-Leu-HisLeu)、肽580(Trp-Asn-Trp-Ala-Asp)、肽567(Val-Tyr-Gln-Phe-Leu)和肽467(Pro-His-Cys-Lys-Arg-Met)进行确认,数据处理采用origin8.0和SPSS15.0进行。结果表明:常用的清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH·)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)这两种方法稳定性和重现性最佳,清除DPPH·和SOD可以作为抗氧化肽初步筛选的方法。