笛鲷鱼鳞源功能多肽对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用

本实验利用650μmol/L H₂O₂构建Caco-2细胞氧化应激损伤模型,探究笛鲷鱼鳞源功能多肽(crimson snapper scale peptides,CSSPs)对Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用。通过测定细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)质量浓度、胞内抗氧化酶活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)相对含量、相关凋亡基因(Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2)的相对表达量,从细胞氧化还原状态和细胞凋亡两方面阐明CSSPs对损伤Caco-2细胞的抗氧化作用。结果显示,CSSPs能够通过抗氧化防御系统来减轻H₂O₂对Caco-2细胞的损伤,主要包括增加胞内抗氧化酶活性以抑制LDH释放、胞内ROS积累、MDA及IL-8的生成。此外,CSSPs抑制氧化应激损伤诱导的细胞凋亡与线粒体...     

英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

二氢杨梅素及其酰化衍生物对肝细胞氧化损伤的保护作用

目的：考察二氢杨梅素(DHM)及其衍生物对肝细胞氧化损伤的保护作用。方法：建立L02细胞过氧化氢损伤模型,通过酶法酰化修饰DHM得到不同亲脂性的DHM衍生物,再通过测定活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平、线粒体膜电位和Caspase 3水平评估DHM及其衍生物对肝损伤细胞的保护作用。结果：除3-O-月桂酰化二氢杨梅素外,其余衍生物处理后的肝损伤细胞中活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)的释放和丙二醛(MDA)水平显著降低,抗氧化酶系水平升高,线粒体膜电位升高,Caspase 3水平降低,其中3-O-辛酰化二氢杨梅素的保护效果最好。结论：中等链长二氢杨梅素衍生物有较好的护肝效果。     

黄刺多糖工艺优化及其对过氧化氢损伤的胰岛β细胞的保护作用

为研究黄刺粗多糖(Berberi dasystachya polysaccharides, BDPs)对H₂O₂诱导的RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用，以黄刺浆果为原料，通过单因素试验和响应面Box-Behnken设计实验优化超声波辅助酶解提取黄刺果实多糖的工艺。采用高效体积排阻色谱、离子色谱、扫描电镜及刚果红实验对BDPs理化性质进行分析，以H₂O₂诱导RIN-m5F细胞建立氧化应激损伤模型，通过CCK-8法测定细胞存活率，DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量探讨BDPs对氧化损伤细胞的保护作用。结果表明，当加酶量为1.25%(质量分数),酶解时间57 min,酶解温度45℃,超声波功率164 W时，黄刺多糖提取得率为(3.478±0.075)%...     

6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞保护作用研究

目的:探讨酸枣仁黄酮类成分6′′′-阿魏酰斯皮诺素预处理对Aβ_1-42诱导损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法:利用6′′′-阿魏酰斯皮诺素（1、5、10、20和40 μmol/L）预处理SH-SY5Y细胞2 h,随后加入5 μmol/L的Aβ_1-42共同孵育24 h,利用CCK-8法检测细胞活力;Calcein-AM/PI双染法观察细胞形态;试剂盒检测细胞内活性氧、丙二醛、线粒体膜电位水平及谷胱甘肽过氧化物酶活力;蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白:Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白的表达。结果:6′′′-阿魏酰斯皮诺素可以抑制Aβ_1-42诱导的细胞凋亡,提高细胞活力(P<0.001);改善Aβ_1-42诱导损伤细胞的氧化应激情况,降低细胞内活性氧(P<0.001)、丙二醛水平(P<0.01),提高谷胱甘肽过氧化物酶活力(P<0.001);改善Aβ_1-42诱导损伤的细胞线粒体功能,上调细胞线粒体膜电位水平(P<0.001);增加抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白的表达(P<0.01),并降低促凋亡蛋白Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白的表达(P<0.01)。结论:6′′′-阿魏酰斯皮诺素对Aβ_1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用,其机制与6′′′-阿魏酰斯皮诺素抗氧化活性及调节凋亡相关蛋白表达有关。     

海绵Hyrtios erectus抗氧化产物超声提取工艺优化及其抗氧化活性分析

为探索海绵动物抗氧化提取物的提取工艺及提取物的抗氧化活性,以H. erectus海绵乙醇提取物的DPPH自由基清除率为响应值,分别考察超声温度、超声时间和超声功率3个影响因素,通过Box-Behnken响应面设计确定最佳超声提取工艺。以该工艺提取物为实验材料,分析其对DPPH自由基、ABTS⁺·和·OH的清除效果,通过构建H₂O₂氧化损伤模型研究提取物对氧化损伤L02细胞的活力和对H₂O₂氧化应激胞内ROS含量的影响。结果表明:可操作的最佳工艺为超声温度57℃,超声时间60 min,超声功率490 W,在此条件下,提取物DPPH自由基清除率为61.98%±1.52%,与预测值62.16%吻合度较好,该提取物对DPPH自由基、ABTS⁺·和·OH具有良好的清除效果,提取物处理组细胞活力均显著高于模型组(P<0.05),且细胞内ROS荧光强度均极显著低于模型组(P<0.01)。总之,该工艺提取物具有较广泛的抗氧化活性,对H₂O...     

海参肽的抗氧化稳定性及对细胞氧化损伤的保护作用

目的：探究不同水解度海参肽(低水解度为SCP-L和高水解度为SCP-H)的抗氧化稳定性及对H₂O₂诱导的L929细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：首先以羟自由基清除率(·OH)为评价指标，考察温度、pH、食品配料、金属离子和模拟胃肠环境对海参肽抗氧化稳定性的影响。然后，利用H₂O₂诱导L929细胞建立氧化应激损伤模型，测定细胞的存活率及细胞水平的抗氧化指标。结果：在20～100℃范围，SCP-L和SCP-H均具有良好的热稳定性；在氯化钠、Cu²⁺、Zn²⁺、碱性和模拟胃液环境下降低了其抗氧化稳定性；模拟胃肠消化，提高了SCP-L和SCP-H的抗氧化活性。SCP-L和SCP-H质量浓度在0.2～0.8 mg/mL时，显著提高了氧化损伤L929细胞的存活率；与模型组相比，SCP-L和SCP-H质量浓度为0.6 mg/mL时，乳酸脱氢酶(LDH)活力分别显著下降了20.67%和25.91%，丙二醛(MDA)含量分别显著下降了26.39%和44.36%，超氧化物歧...     

南、北五味子蛋白抗氧化活性和对HepG2细胞氧化应激损伤的修复作用

采用碱提酸沉法提取南五味子蛋白(Schisandra sphenanthera protein, SSP)和北五味子蛋白(Schisandra chinensis protein, SCP),并测定其体外清除自由基能力、还原能力和对H₂O₂诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8法检测细胞增殖率,荧光检测胞内活性氧水平,酶联免疫吸附法检测细胞氧化应激产物和抗氧化物酶系活性。结果表明,SSP清除自由基和还原能力均优于SCP,SSP与SCP都能对H₂O₂诱导HepG2造成的细胞生长抑制起到修复作用(P<0.05),显著降低胞内活性氧、丙二醛水平(P<0.05),显著提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽的水平(P<0.05),且SSP对H₂O₂诱导的HepG2氧化应激损伤修复能力优于SCP。综上,2种五味子蛋白中SSP更适合应用于抗氧化功能性食品或保健食品工业中。     

柠檬皮中多酚的超声辅助提取及其抗氧化性研究

以柠檬皮为对象，采用超声辅助乙醇法提取多酚；化学法和H₂O₂损伤HepG2细胞氧化模型评价柠檬皮多酚提取物的抗氧化活性。结果表明，柠檬皮多酚的提取工艺为超声功率200 W、乙醇体积分数60%、超声温度55℃、料液比1:20(g/m L)、超声时间45 min，此条件下柠檬皮多酚得率为(1.76±0.12)%。柠檬皮多酚提取物具有DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基清除能力，显著抑制H₂O₂氧化损伤HepG2细胞，减少胞内ROS的生成，表现出较强的抗氧化性。     

饲料酵母水溶物具有促进草鱼原代肝细胞生长及修复过氧化氢损伤的作用

研究以3种酵母水溶物为实验材料,探究饲料酵母对草鱼原代肝细胞生长的促进作用和过氧化氢(H₂O₂)诱导草鱼原代肝细胞氧化损伤的缓解作用。实验使用酶消化法分离得到草鱼原代肝细胞,以200μmol/L H₂O₂处理细胞1 h建立氧化应激模型;分别选取质量浓度为25、50、100、200、400 mg/L的饲料酵母水溶物处理细胞,比较3种饲料酵母水溶物对原代肝细胞的促生长效果;分别使用3种饲料酵母的最佳促生长质量浓度处理模型细胞,分析饲料酵母水溶物对H₂O₂诱导的氧化损伤的缓解作用。结果表明：3种饲料酵母水溶物均能促进原代肝细胞增殖,酵母培养物YC-A、YC-B、酵母细胞壁多糖YCP的最佳促生长质量浓度分别为100、200、100 mg/L,在该质量浓度下细胞活力较对照组极显著提高(P<0.001)。相比于H₂O₂模型组,3个饲料酵母水溶物组细胞活力和MMP极显著提高(P<0.001),培养液中LDH活性极显...     

红毛藻多糖对H2O2诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究红毛藻多糖（Bangia fusco-purpurea polysaccharide,BFP）对H2O2诱导的人结肠腺癌（Caco-2）细胞氧化应激损伤的保护作用。方法：构建过氧化氢（H2O2）诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,通过形态学观察和测定细胞裂解液中的抗氧化物水平及相关酶活力,评价BFP对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果：BFP可明显提高H2O2诱导氧化损伤的Caco-2细胞活力,降低细胞内活性氧生成水平,提高细胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽水平,减少丙二醛生成,并通过抑制Caspase-3和Caspase-9活性来改善氧化应激损伤引起的细胞凋亡。结论：BFP对H2O2诱导氧化应激损伤的Caco-2细胞具有保护作用,可通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H2O2诱导的Caco-2细胞氧化应激损伤。     

壳寡糖对自由基的清除及对N9小胶质细胞的保护作用

目的：研究壳寡糖(COS)的抗氧化作用及其对脂多糖(LPS)损伤N9 小胶质细胞的保护作用。方法：首先在细胞外检测COS 对DPPH 自由基、H2O2 和羟自由基的清除作用,然后采用LPS 诱导建立体外培养N9 小胶质细胞活化模型,将细胞分为正常对照组、LPS 模型组、LPS+COS 给药组(COS 质量浓度分别为50、100、200、300、400μg/mL)。观察各组细胞的形态;检测各组细胞培养液中一氧化氮(NO)含量;用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平并观察其荧光图像;用DNA 损伤实验观察各组细胞凋亡情况。结果：COS 能有效清除DPPH 自由基和羟自由基,对H2O2 无清除能力;COS 能减少活化的N9 细胞数量并明显降低LPS 活化的N9 细胞培养液中NO 水平,降低细胞内ROS 水平,减少LPS 诱导的细胞凋亡,保护N9 小胶质细胞。结论：COS 在N9 小胶质细胞内外均具有较强的抗氧化能力,能保护N9 小胶质细胞,减轻N9 小胶质细胞的氧化损伤。     

不同形态硒与VE联用对H_2O_2诱导人脐静脉血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:研究不同形态硒化合物(有机硒:L-硒甲基硒代半胱氨酸;无机硒:亚硒酸钠)单独使用及其与VE联合使用后对H_2O_2诱导人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)产生氧化应激损伤的保护作用。方法:采用体外细胞培养方法,将HUVECs随机分为7组:对照组、H_2O_2组、L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-Se-methylselenocysteine,L-Se MSC)组、亚硒酸钠(sodium selenite,SS)组、VE组、L-Se MSC+VE联用组、SS+VE联用组。经不同样品干预处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测HUVECs存活率;检测各组细胞内脂质氧化终产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性的变化。结果:各处理组HUVECs存活率之间没有显著差异;与H_2O_2组比较,0.1 mg/L亚硒酸钠、10 mg/L VE处理能使HUVECs内MDA生成量显著减少,SOD和GSH-Px活性显著升高,并且亚硒酸钠和VE联合使用在细胞水平上具有显著的协同作用,而L-Se MSC组与对照组无显著差异。结论:亚硒酸钠和VE均可保护由H_2O_2诱导引起的HUVECs氧化损伤,提高HUVECs抗氧化能力,并且亚硒酸钠和VE联用具有明显的协同抗氧化作用。     

蛋清源活性肽对过氧化氢诱导的HEK293细胞抗氧化酶活力及白细胞介素8分泌的影响

食源性抗氧化肽由于抗氧化能力较好、安全性高,逐渐成为多肽研究领域的热点。本实验以H2O2诱导HEK293细胞损伤建立氧化损伤模型,研究了蛋清源活性肽WNWAD（Trp-Asn-Trp-Ala-Asp）及其结构改造肽WNW（Trp-Asn-Trp）、WAD（Trp-Ala-Asp）、WN（Trp-Asn）对H2O2诱导损伤的HEK293细胞的存活率、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平、抗氧化酶活力及细胞因子白介素8（interleukin-8,IL-8）分泌的影响。结果表明：蛋清源活性肽对HEK293细胞存活率的影响极显著（P＜0.01）,不同浓度蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN作用于氧化损伤的HEK293细胞后,其存活率明显提高,呈现浓度依赖性;其中1.0 μmol/L蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN处理细胞后,存活率从损伤组的（48.0±2.4）%分别提高到（99.7±1.8）%、（69.4±3.2）%、（78.9±5.1）%、（72.1±3.6）%,与损伤组有极显著性差异（P＜0.01）;H2O2诱导HEK293细胞内ROS的产生,经过活性肽预处理后细胞内ROS的水平极显著降低（P＜0.01）;随着蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN浓度的升高,总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶3 种酶的活力均有所提高,呈现浓度依赖型关系。最后利用酶联免疫吸附测定试剂盒测定了HEK293细胞中IL-8的分泌量,经过H2O2处理的HEK293细胞上清液中IL-8含量极显著升高（P＜0.01）,加入WNWAD、WNW、WN、WAD后,细胞中的IL-8含量均有所降低,其中WNWAD和WN影响显著（P＜0.05）。以上结果显示蛋清源活性肽对降低HEK293细胞氧化应激水平和提高细胞抗氧化能力有积极的影响。     

壳寡糖对酒精诱导的新生大鼠脑组织氧化应激损伤和凋亡因子的影响

目的：研究壳寡糖对酒精诱导的新生大鼠脑组织氧化应激损伤和细胞凋亡的抑制作用。方法：将56 只SD新生大鼠随机分为正常组（NC）、药理组（COS）、模型组（Mod）、壳寡糖干预组（COS＋Mod）,通过对SD新生大鼠进行灌胃酒精干预造模。通过体质量变化、病理学观察、氧化应激损伤和凋亡相关蛋白表达情况评估壳寡糖的保护作用。结果显示,壳寡糖干预后能缓解酒精诱导新生大鼠的体质量增长缓慢,缓解脑神经细胞坏死变形,提高脑组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）水平和总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）,明显降低脑组织的丙二醛（malondiadehyde,MDA）含量。壳寡糖干预能明显改善酒精造成的新生大鼠脑部氧化应激损伤,降低促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3的表达。结论：壳寡糖对酒精诱导的新生大鼠脑损伤具有明显的保护作用,其机制可能与壳寡糖能够缓解酒精诱导的脑组织氧化应激损伤和抑制神经细胞凋亡有关。     

榆干离褶伞溶栓酶对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的：探讨榆干离褶伞（Lyophyllum ulmarium,L.u）溶栓酶对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞（humanumbilical vein endothelial cell,HUVEC）损伤的保护作用。方法：用H2O2诱导HUVEC氧化损伤,采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法观察细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞线粒体跨膜电位（ΔΨm）和总活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;Western blotting法检测Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3等蛋白的表达水平。结果：L.u溶栓酶可显著提高HUVEC的存活率,明显抑制H2O2诱导的细胞内ROS生成和线粒体跨膜电位的下降,并能降低Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的表达水平。结论：L.u溶栓酶对氧化应激损伤的HUVEC有保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

Effects of a synthetic di-phosphoserine peptide (SS-2) on gene expression profiling against TNF-α induced inflammation

It has been showed bioactive di-phosphoserine peptide (SS-2) possesses functions to ameliorate oxidative stress in vitro. This study aimed to substantiate the role of bioactive di-phosphoserine peptide (SS-2) in modulating inflammatory responses in TNF-α-stimulated HT-29 cells, and its mechanism of action. SS-2 significantly reduced IL-8 secretion in TNF-α-induced HT-29 cells, and also suppressed pro-inflammatory cytokines, including IL-8, IL-12, MCP-1 and TNF-α. Moreover, SS-2 inhibited TNF-α initiated signalling cascades by suppressing phosphorylation of the ERK1/2, JNK, P38 and IκB those culminate in above cellular inflammatory responses. Differentially expressed genes analysis within NF-κB signalling pathway revealed that SS-2 blocks multiple sites of upstream NF-κB signalling cascade, including FADD and MyD88, thereby preventing the signalling transduction involved in cellular inflammatory response. These results provide a new insight into molecular mechanism for anti-inflammatory action of SS-2, suggesting SS-2 is a potential alternative approach to treat IBD by particular targeting TNF-α driven inflammatory event.