人母乳源乳酸菌的筛选、鉴定及其降血压能力的初步测定

研究旨在从人母乳中筛选乳酸菌,并对其降血压能力进行初步测定。采用透明圈法从新鲜人母乳中分离出22株乳酸菌,经16S rDNA鉴定,分别为植物乳杆菌17株、格氏乳杆菌3株、罗伊氏乳杆菌2株;在pH3.0和含0.3%胆盐条件下分别培养1 h和3 h。结果显示,菌株的活菌数均在108cfu/m L以上;降血压试验的研究显示,22株乳酸菌均具有一定的降血压能力,其ACE抑制率最高可达95.53%。从人母乳中获得的22株乳酸菌表现出了超强的益生潜力及降血压能力,为母乳中益生菌的开发提供了良好的依据。     

副干酪乳杆菌N1115的耐酸耐胆盐特性研究

本研究对从内蒙古传统发酵乳制品中获得的副干酪乳杆菌N1115（LactobacillusparacaseiN1115）和从市场发酵乳中分离的18株乳酸菌进行了耐酸性（pH2．0）和耐胆盐（pH8．O）特性的研究，结果显示，酪乳杆菌N1115与商业菌株相比，在耐酸耐胆盐特性方面具有明显的优势，具有良好的益生菌开发潜质。     

人源乳酸菌耐酸耐胆盐能力及降胆固醇作用研究

利用选择性培养基、人工胃液及含胆盐培养基,从如皋长寿地区的人群肠道中分离筛选出耐酸耐胆盐能力较强的乳酸菌,并研究其降胆固醇能力及方式。结果表明,分离筛选的60株乳酸菌在pH 3.0的人工胃液中存活率均30%;来源于中年组、老年组及长寿组的乳酸菌存活率分别为69%,71%,70%,均显著高于青少年组(P0.05);在0.3%及0.5%胆盐培养基中的存活率均20%,老年组及长寿组的乳酸菌在0.3%胆盐培养基中的存活率分别为53.85%,55.26%,均显著高于青少年组和中年组(P0.05);来源于长寿组的乳酸菌降胆固醇能力显著高于中年组(P0.05),其中,乳杆菌属与魏斯氏菌属的胆固醇降解率显著高于肠球菌属(P0.05),其降胆固醇的主要方式为细胞吸收和共沉淀。来源于长寿地区人群的乳酸菌耐酸耐胆盐能力及降胆固醇能力较强,其中长寿组的乳酸菌要高于其他年龄组。     

乳酸菌的抗氧化活性和耐酸耐胆盐性能的研究

以清除DPPH自由基和还原能力为指标,对实验室保藏的25株乳酸菌的菌体和无细胞提取物进行体外抗氧化性研究;将抗氧化性强的10株乳酸菌,进行对模拟胃液酸度和肠道胆盐的耐受性研究,比较不同乳酸菌株的抗氧化和耐酸耐胆盐能力,为开发功能性乳酸菌食品提供理论依据。研究表明:不同属和同属的不同菌株的乳酸菌抗氧化能力和耐酸耐胆盐存在差异,且其抗氧化活性物质存在部位不同。比较发现干酪乳杆菌GL-2抗氧化性高且耐酸耐胆盐。干酪乳杆菌GL-2菌体浓度为109cfu/mL时,菌体和无细胞提取物DPPH自由基清除率分别为37.22%、42.78%,还原活性分别相当于104.84、107.10μmol/L L-半胱氨酸;pH=3.0的酸性缓冲溶液处理2h后存活率均达100%,在改良MRS培养基(胆盐为0.5%(W/V))处理4h存活率为0.35%。     

传统泡菜中抗性乳酸菌的筛选及鉴定

以传统泡菜中分离出的40株乳酸菌为对象,通过耐酸、抗人工胃液和抗胆盐试验,确定传统泡菜中具有良好抗性的乳酸菌,并使用16S rDNA序列和系统发育树分析良好抗性乳酸菌的种属关系。试验结果表明,40株乳酸菌中编号MFR-28和MFR-30两株菌对人工胃液和胆盐具有较强的耐受能力,其在人工胃液中的存活率分别为85.21%和90.47%,在0.3%胆盐中的生长效率分别为11.84%和7.37%;经16S rDNA序列和系统发育树分析,MFR-28和MFR-30均为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。该研究筛选出的2株抗性干酪乳杆菌,可作为潜在益生菌进一步探索其生理功能,以期用于开发益生菌产品。     

酸汤中乳酸菌的鉴定及其耐酸、耐胆盐和抗氧化活性

采用16S rDNA基因序列对从酸汤中分离出的6株乳酸菌进行鉴定,并研究6株菌的耐酸和耐胆盐能力;同时以清除1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟基自由基为指标,探究其体外抗氧化活性。结果表明,6株菌均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),可耐受pH2.5和0.3%质量分数的胆盐,且活菌数保持在107 CFU/mL以上,存活率大于87%;菌体浓度为108 CFU/mL时,6株菌对DPPH自由基的清除率在23%~35%之间,对羟基自由基的清除率在6%~16%之间。6株植物乳杆菌中,JMST-1兼具良好的耐酸、耐胆盐和一定的抗氧化能力,在耐酸、耐胆盐试验中存活率达到91%,对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别达到28.60%和15.44%。     

两株乳酸菌对高脂模型大鼠的益生作用

为探究两株筛选自青藏高原传统发酵牦牛酸奶乳酸菌高脂模型大鼠体内的益生作用。通过前期体外实验发现,菌株BX-1是一株产胆盐水解酶的瑞士乳杆菌,而BX56是一株不产胆盐水解酶的罗伊氏乳杆菌。大鼠体内灌胃实验结果显示,灌胃瑞士乳杆菌BX-1能够显著降低大鼠血清和肝脏胆固醇及甘油三酯水平(P0.05),同时能够减少脂类物质在大鼠肝脏组织内的沉积,促进体内脂质的排泄,而灌胃罗伊氏乳杆菌BX56在大鼠体内降血脂的效果并不明显。结果表明瑞士乳杆菌BX-1具有良好降胆固醇效果,具有潜在的治疗高脂血症的作用。     

具有胆盐水解酶活性乳酸菌的筛选及影响其活性因素分析

具有胆盐水解酶活性的乳酸菌有潜在的降低血液胆固醇的作用。对分离自酸马奶的10株乳杆菌的胆盐水解酶活性进行了定性及定量分析,在此基础上对影响胆盐水解酶的一些因素进行了研究。结果表明,3株乳杆菌具有胆盐水解酶活性,其中以MG13-3为最高,其次为XB4-1及MG16-3;当pH值为6时,超声波破碎时间在12～15min之间,培养基中加入巯基乙酸钠并在厌氧条件下培养时,3株乳杆菌均体现出较高的胆盐水解酶活性。     

鼠李糖乳杆菌耐酸及胆盐能力研究

本实验对来源于婴儿粪便鼠李糖乳杆菌进行耐酸、耐胆盐能力表征及模拟胃液和模拟肠液实验。结果获得鼠李糖乳杆菌菌株B在pH1.8条件下,维持2h,活菌数达到107CFU/ml以上;在pH值为2.2以上的培养基中生长良好,而且随着时间的延长菌株的数量增加。在胆盐浓度在0.5%以下的MRS-broth培养基中鼠李糖乳杆菌B菌株维持4h,活菌数均达到108CFU/ml以上,而且随着时间的延长活菌数均有所增加。模拟胃液和模拟肠液实验结果表明该菌株能够有效通过胃环境,并能在肠道中繁殖。结果可见,鼠李糖乳杆菌B具有较强的酸的胆盐的耐受能力,符合微生态制剂和乳酸菌发酵功能食品菌种的要求。     

一株罗伊氏乳杆菌的生物学特性研究

研究了一株完达山乳业和润盈生物菌种研究项目组分离的罗伊氏乳杆菌LR-G100的耐胃酸、耐胆盐、降胆固醇和抑制肠道有害菌的生物学特性。结果表明,罗伊氏乳杆菌在pH值为2.5～4.5条件下,具有较强的生存能力;在胆盐质量分数为0.1%～0.5%环境中,活菌数能保持在106mL-1以上;在反应16 h后,同化胆固醇百分率能达到50%以上;对肠道有害菌的抑制效果也非常显著。     

产抑菌物质乳酸菌的筛选及其抑菌特性研究

目的 本文旨在筛选具有广谱抑菌活性的乳酸菌,为其在食品保鲜中的应用奠定基础。方法 以MRS和M17为培养基,对韩国传统泡菜中乳酸菌进行分离鉴定,通过琼脂孔扩散法筛选具有广谱抑菌活性的乳酸菌,并分析它的耐酸、耐胆盐能力,以及对温度、pH、发酵时间的敏感性。结果 以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、枯草芽孢杆菌为指示菌进行抑菌活性筛选,获得一株抑菌效果最佳的植物乳杆菌PC4-5。植物乳杆菌PC4-5在酸性条件（pH=2）处理2 h后存活率达到43.79%,0.5%胆盐处理2 h后存活率达到21.02%,说明植物乳杆菌PC4-5具有较好的耐酸、耐胆盐能力。经排酸排过氧化氢试验后,发酵上清依然保留抑菌活性,蛋白酶处理后抑菌活性丧失,表明该抑菌物质为细菌素。该细菌素在pH为2-6的范围有抑菌能力,且有较好热稳定性。结论 植物乳杆菌PC4-5适用于酸性食品的防腐保存,在食品保鲜中的应用有较大的潜力。     

青藏高原牦牛酸奶中降胆固醇乳酸菌的筛选及特性研究

目的:本研究旨在从天祝、那曲、若尔盖、玉树、红原和玛曲采集的202份牦牛酸奶样品中,筛选出具有高降胆固醇特性的优良菌株。方法:选择MRS、M17和SL培养基(MRS培养基是培养乳酸菌的基础培养基,M17培养基和SL培养基均为分离乳酸菌的培养基,其中SL培养基为分离嗜酸性乳酸菌的培养基)进行分离纯化,过氧化氢筛选阴性菌。根据邻苯二甲醛法测定胆固醇,筛选具有降解脂溶性胆固醇能力的菌株,水溶性胆固醇法复筛验证菌株降解能力,16SrDNA分子生物学法鉴定其种属。结果:分离纯化后总计720株乳酸菌,所有菌株经初筛都具有一定的胆固醇降解能力,其中降解率在68%以上的菌株,共有52株,菌株BX39的胆固醇降解率高达90.05%;复筛发现菌株BT18胆固醇降解率高达96.26%;16S rDNA分子生物学法分析比对后发现,72株乳酸菌中有64株罗伊氏乳杆菌、4株乳酸片球菌、3株瑞士乳杆菌和1株植物乳杆菌。结论:罗伊氏乳杆菌BT18具有高降胆固醇特性,可作为后备菌株进一步的研究和利用。     

植物乳杆菌耐酸耐胆盐的体外试验及其降胆固醇作用

目的:研究产胆盐水解酶植物乳杆菌H13的耐酸、耐胆盐特性,在此基础上对其可能的降胆固醇作用机理进行体外试验研究.方法:采用MRS培养基,模拟人体胃酸环境(pH=3)和胆盐环境(0.3%),测定H13菌株在酸性及高胆盐环境作用后的存活菌数,并在此胆盐浓度下测定植物乳杆菌H13的胆盐水解酶活力、降解胆盐能力和胆固醇沉淀量.结果:菌体能够耐受pH 3的环境和0.3%的胆盐环境;该菌产生的胆盐水解酶在降低胆固醇方面具有重要作用,酶活性与游离胆酸量、胆固醇沉淀量呈正相关,而且胆盐水解酶对反应底物的特异性不同,以甘氨胆酸钠为佳.结论:植物乳杆菌H13体外降胆固醇作用的机理主要是其产生的胆盐水解酶使胆盐失去共轭作用,在酸性(pH<6.0)条件下,解共轭胆盐与胆固醇形成复合物共同沉淀下来.     

具有降胆固醇功能的罗伊氏乳杆菌的筛选及其益生作用

为获得具有较强降胆固醇功能的益生菌株,试验从内蒙古呼伦贝尔满洲里通达牧场制作的奶豆腐中筛选分离菌株,并采用邻苯二甲醛法测定菌株降胆固醇的能力,从中选出降胆固醇能力强的菌株,通过形态学鉴定、生理生化及16S rDNA对菌株进行鉴定,并测定了其耐受酸、胆盐和胃肠液的能力。结果筛选分离出5株具有降胆固醇功能的菌株,其中一株菌对胆固醇降解能力最强,降解率达50.60%,经鉴定此株菌为罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,将其命名为HCS02-001（CGMCC No. 19746）;经对酸、胆盐及胃肠液的耐受试验,该株菌在pH 3.0和pH 2.0的环境中培养17 h后存活率分别为86.80%和85.52%;在0.30%、0.50%的胆盐浓度环境中培养17 h后存活率分别为97.42%和95.17%;在人工胃液中作用3 h,存活率为96.74%;在人工肠液中作用4 h,存活率高达98.41%。该研究筛选出了一株具有较好降胆固醇功能的罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,其具有较强的耐受酸、胆盐环境和胃肠液的能力,对关于降胆固醇功能方面的产品研究开发具有重要意义。     

东北传统腌渍蔬菜中产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及其生物特性研究

采用薄层层析色谱法结合Berthelot比色法，从东北传统腌渍蔬菜中筛选产γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌。采用生理生化测定及16S rRNA测序鉴定乳酸菌。通过主成分分析法对其耐酸、耐胆盐、抗氧化、抑菌性及产酸速率等生物特性进行综合评价，筛选具有良好生物特性的乳酸菌。结果表明:从源于传统腌渍蔬菜的40株乳酸菌中获得5株典型产GABA乳酸菌菌株，经鉴定1株为坎氏魏斯氏菌HJL2，另4株均为植物乳杆菌，分别是菌株PJ-7、HJG1-3、L-9、L-11。其中，分离自发酵萝卜的植物乳杆菌PJ-7合成GABA的能力较好，产量达0.48 mg/mL。5株乳酸菌的耐酸、耐胆盐、抗氧化等生物特性存在显著性差异，通过主成分分析确定植物乳杆菌PJ-7的生物特性综合评分位列第一。植物乳杆菌PJ-7优良的GABA合成能力以及良好的生物特性可为研发富含GABA的腌渍蔬菜提供理论参考。     

鲈鱼肠道来源降胆固醇乳酸菌分离筛选及其益生功能评价

该研究探讨了从健康鲈鱼肠道中筛选分离出高效降胆固醇的乳酸菌,通过菌株鉴定、耐酸、耐胆盐、疏水性、自凝聚力和代谢物抑菌性评价的测定,评价并考察其体外益生作用。采用胆盐水解酶测定和体外降胆固醇试验,筛选分离得到一株高效降胆固醇的菌株ZG2YLu05,其胆盐水解酶（BSH）粗酶活和胆固醇去除率分别为0.82 µmol/(h?mL)和50.09%;在pH 3.0的培养条件下培养8 h,菌株的耐酸存活率为83.33%;在胆盐浓度0.3%的培养条件下培养8 h,菌株的耐胆盐存活率高达89.31%;在二甲苯中菌株的疏水性为46.82%,静置24 h后菌株的自凝聚力为92.93%,说明菌株具有良好的黏附潜力;菌株代谢物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌都有明显的抑制作用;经形态学观察和16S rDNA鉴定为戊糖乳杆菌（Lactiplantibacillus pentosus）。该菌株能够作为潜在降胆固醇乳酸菌用于开发辅助降脂益生菌制剂的生产。     

3株植物乳杆菌LPL04、LPL05、LPL14的益生特性

对广东省微生物种质资源库保藏的3株野生植物乳杆菌LPL04、LPL05、LPL14进行体外实验,对其耐酸、耐胆盐、抑菌、降胆固醇能力进行探讨,为接下来的菌种优化提供方向。通过活菌计数测定3株植物乳杆菌耐酸、耐胆盐能力,通过抑菌圈法测定3株植物乳杆菌抑菌特性,通过邻苯二甲醛法测定植物乳杆菌的胆固醇降解能力。结果表明,其中植物乳杆菌LPL05耐酸能力最强,p H2.5条件下2 h活菌数达2.0×107 cfu/m L,存活率为72.9%;LPL04耐胆盐能力最好,0.3%胆盐水平下2 h活菌数依然达到2.05×107 cfu/m L水平,存活率为36.6%;LPL04对藤黄微球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌均有良好的抑制效果;LPL14在体外降解胆固醇量最大,降解量为17.86μg/m L;3株菌均有良好的益生菌潜力。     

降胆固醇乳酸菌的益生特性及其作用机理

考察了具有降胆固醇乳酸菌(乳酸乳球菌L14-3、鼠李糖乳杆菌118-1、粪肠球菌M53-2、植物乳杆菌117-1、植物乳杆菌23-1)的益生特性,且初探乳酸菌降胆固醇的作用机理。通过模拟胃液、胰液进行乳酸菌的耐酸耐胆盐测定,并评价了乳酸菌对抗生素的抗性。通过胆固醇、胆盐的共沉淀作用和菌体细胞吸收两种方式去除发酵液中的胆固醇,利用邻苯二甲醛法测定胆固醇的含量,确定胆固醇的去除率。结果表明:通过共沉淀作用和菌体吸收,乳酸乳球菌L14-3和鼠李糖乳杆菌118-1分别去除胆固醇的比例最高。在pH=2.0的人工胃液中,粪肠球菌M53-2和乳酸乳球菌L14-3的活菌数显著高于其他3株菌(P0.05)。粪肠球菌M53-2对pH 3.0的人工胃液有较好的耐受性,存活率显著高于其他4株菌(P0.05)。在pH=8.0人工胰液中,鼠李糖乳杆菌118-1和植物乳杆菌117-1的存活率显著高于其他菌株(P0.05)。植物乳杆菌117-1耐药性最好。因此,研究具有降胆固醇的益生菌具有广阔应用前景。     

湖南剁辣椒降解亚硝酸盐乳酸菌筛选鉴定及发酵特性研究

为筛选出湖南地区剁辣椒中具有高效降解亚硝酸盐的乳酸菌,从湖南省4个市采集的12个样品中共分离出33株乳酸菌。将分离出的乳酸菌在含有250 mg/L亚硝酸盐的MRS培养基中培养24 h,选取降解亚硝酸盐能力较强的乳酸菌,进行16S rDNA分子生物学鉴定,并测定其发酵特性。实验中选育了4株具有较强降解亚硝酸盐能力的乳酸菌,分别为短乳杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌以及戊糖乳杆菌,其中德氏乳杆菌降解亚硝酸盐的能力最强,MRS培养基中生长24 h,其亚硝酸盐降解率为87.7%,发酵罐恒定pH值6.0,培养24 h,其降解率为98.9%。德氏乳杆菌具有良好的耐酸、耐盐与快速产酸能力,可作为果蔬发酵剂进一步开发利用。     

西部乳源乳酸菌胆盐解离能力筛选及其性能评价

目的:探究青海、甘肃、新疆、西藏和内蒙古等5个西部牧区的传统发酵乳品中乳酸菌的胆盐解离能力,为筛选高胆盐解离能力的优良菌株提供理论依据。方法:利用高效液相色谱技术,分析分离自西部传统发酵乳品中的275株乳酸菌的胆盐解离能力,筛选出性能优良菌株,测定其产γ-氨基丁酸能力。结果:①筛选出具有胆盐解离能力的菌株83株,不同来源、种类的阳性株筛出率存在差异,其中西藏奶渣呈较高的阳性株筛分率,其中副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和短乳杆菌表现最优。②阳性株对6种结合态胆盐解离能力存在显著差异(P0.05),其中对甘氨酸结合态胆盐的解离能力高于牛磺酸结合态胆盐。③区域间比较显示:不同地区阳性株对4项胆盐解离指标存在显著性差异,其中来源于新疆和西藏的阳性株胆盐解离能力显著高于青海和内蒙古的阳性株(P0.05);④乳种间比较显示:不同乳种阳性株对3项胆盐解离指标存在显著性差异,其中来源于奶渣中的阳性株对总胆盐解离能力显著高于酸马奶、酸牦牛奶中的阳性株(P0.05);⑤优良菌株间比较显示:不同菌种对5项胆盐解离指标存在显著性差异,短乳杆菌和植物乳杆菌对总胆盐的解离能力显著高于副干酪乳杆菌和干酪乳杆菌(P0.05)。⑥4种优良菌株产γ-氨基丁酸能力分析:短乳杆菌和植物乳杆菌有较高产γ-氨基丁酸能力,而副干酪乳杆菌和干酪乳杆菌不产γ-氨基丁酸。结论:胆盐解离能力因菌株来源和种类不同而存在差异,以新疆酸马奶、酸驼奶和西藏奶渣中的阳性株胆盐解离能力表现最优,其中短乳杆菌和植物乳杆菌显示较强的胆盐解离能力,并具有高产γ-氨基丁酸能力。