影响单酶法制备核桃多肽的因素研究

为寻求核桃多肽的最佳制备方法,以酶法水解核桃蛋白为基础,通过单因素和正交试验对核桃多肽制备工艺进行优化。结果表明,在酶解时间3 h、酶解温度38 ℃、pH 6.8、酶添加量4%、底物浓度为2.4%时,核桃多肽的抗氧化活性最佳,此时DPPH清除率可达92.35%。     

超声辅助核桃饼脱脂和多肽制备工艺的优化

采用超声辅助核桃饼脱脂,并以脱脂核桃粉为原料制备核桃蛋白,采用碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备多肽。通过单因素实验和正交实验对超声辅助核桃饼脱脂和核桃多肽制备工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的核桃多肽的特性进行分析。结果表明:超声辅助核桃饼脱脂最优条件为料液比1∶20、超声功率500 W、超声时间140 min,在最优条件下脱脂率为91.23%,蛋白损失率为11.32%;酶解制备核桃多肽的最优工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 9、加酶量3.0%、酶解时间5.0 h,在最优条件下水解度达到22.63%,多肽得率为88.24%。核桃多肽粗蛋白质含量约为95%,相对分子质量小于1 000 Da的多肽占比达91.61%。     

酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

以核桃蛋白粉为原料制备核桃蛋白抗氧化活性肽,分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的核桃多肽抗氧化活性,确定碱性蛋白酶是酶解核桃蛋白的最适蛋白酶。研究了酶解温度、酶解时间、酶解pH、底物浓度、酶添加量等酶解条件对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明:不同的酶解条件对酶解产物核桃多肽的抗氧化活性有显著影响,最佳酶解条件为:温度50℃,时间120 min,pH8,底物浓度3%,酶添加量3%,在此酶解条件下制得的核桃多肽对羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别为53.8%和50.0%,还原能力为51.7%。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。     

核桃饼粕蛋白提取、多肽制备条件优化及其酶解液的抗氧化性研究

本研究以去除多酚的核桃粕为原料,利用均匀试验优化核桃粕碱溶性蛋白提取条件,利用二次通用组合旋转设计优化双酶法制备核桃粕多肽制备条件,结合项目组前期建立的模拟胃肠道消化体系及模拟胃肠道消化体系+混合乳酸菌两种体系,制备核桃粕蛋白酶解液,采用体外实验对比三种体系制备核桃粕蛋白酶解液的抗氧化活性。核桃粕蛋白质最佳提取条件为:提取溶液的pH11、料液比为1:21 (g/mL)、提取温度65 ℃、提取时间70 min,提取2次,在此条件下提取液蛋白含量为221.6233 mg/g。双酶法制备核桃粕多肽工艺条件分为两个阶段,第一阶段胃蛋白酶酶解阶段,其最佳条件为:底物质量浓度为1 g/100 mL、pH2.4、加酶量为133.53 U/g、温度为40 ℃、时间139 min,在此条件下酶解,核桃粕多肽酶解液水解度25.90%;第二阶段胰蛋白酶酶解阶段,其最佳条件为:加酶量800 U/g、温度20 ℃、pH为6、酶解时间240 min,在此条件下酶解,核桃粕多肽酶解液的水解度为35.57%。三种酶解液的总抗氧化能力V_C当量值分别为:双酶酶解液0.0516 mg/mL,体外模拟胃肠道消化酶解液0.0634 mg/mL、体外模拟胃肠道消化+混合乳酸菌酶解液0.0411 mg/mL,用双酶、体外模拟胃肠道消化、体外模拟胃肠道消化+混合乳酸菌三种体系制备的核桃粕蛋白酶解液均具有抗氧化性活性,而双酶法制备的核桃粕酶解液具有较强的抗氧化活性。     

影响双酶复配同步酶解制备核桃多肽的因素

为寻求核桃多肽的最佳制备方法,采用双酶水解核桃饼粕,以水解度为考察指标,研究复合酶质量配比、温度、pH值、底物质量浓度、时间、酶添加量对酶解的影响。通过单因素和正交试验对双酶水解核桃饼粕制备核桃多肽的影响因素进行研究。结果表明:复合酶质量配比为2∶1、温度为40℃、pH值为7.2、底物质量浓度为40 g/L、时间为4 h、酶添加量为5%。在最佳条件下,核桃饼粕的水解度为26.72%。     

核桃粕中多肽的酶法制备工艺

探索生物酶法水解核桃蛋白制备核桃多肽的工艺。以酶解蛋白的水解度和氮溶指数作为考察指标,单因素筛选核桃蛋白水解酶、反应底物的液料比、酶解时间等条件,优化酶水解核桃蛋白及制备核桃多肽的提取的工艺参数。选用胰蛋白酶作为核桃蛋白的水解酶,酶解条件为:pH 7.0,温度45℃,液料比10∶1 (mL/g),酶解时间240 min,添加量4 000 U/g。该条件下改性后的核桃蛋白氮溶指数为69.61%,水解度为39.31%,提取的多肽分子量小于1 450 Da的含量为36.33%。基于酶水解法,此次试验的提取工艺合理可行,为核桃多肽的提取提供了理论依据。     

超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽工艺研究

采用超声辅助复合酶法制备核桃抗氧化肽,超声辅助酶解最佳工艺为复合酶添加量3%,酶解温度50℃,酶解p H 7.5,酶解时间70 min,超声功率150 W。利用混料设计对复合酶配比进行优化,确定复合酶质量比为1.42∶1∶2.66。在最优工艺条件下制备的核桃多肽DPPH自由基清除率为84.94%,其抗氧化能力低于维生素C,与维生素E接近。     

运用Box-Behnken设计优化核桃多肽制备工艺

以薄皮核桃为原料,研究酶解工艺对核桃多肽浓度的影响。该研究通过单因素试验,以核桃多肽浓度为监测指标,确定了酶解温度、pH、时间及加酶量四因素的适宜作用范围。在此基础上,利用Box-Behnken中心组合试验,以核桃多肽浓度为响应值进行响应面分析,对碱性蛋白酶酶解的工艺条件进行优化。结果表明,酶解的最佳工艺条件为酶解温度50. 24℃、加酶量2. 03%、酶解pH 7. 13、酶解时间4. 2 h。此条件下,多肽质量浓度为2. 55 mg/mL,较优化之前提高了两倍多。验证试验结果与优化结果误差<2%,优化结果可靠。酶解工艺的优化对提高核桃粕的利用率具有重要意义,研究结果为核桃多肽的工业化应用提供了理论依据。     

核桃多肽的制备工艺优化及抗氧化活性研究

试验以核桃蛋白粉为原料,分别采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶以及碱性蛋白酶进行酶解。对影响酶解的主要因子pH、酶解温度、加酶量以及底物浓度进行单因素试验,采用响应面法优化核桃多肽的水解工艺。结果表明:在pH 9.0,温度53℃,加酶量7 430 U/g底物以及底物浓度为2.2%时达到最佳。在此条件下,三次重复验证性试验测得核桃蛋白水解度为14.54%±0.32%。该工艺制备的核桃多肽抗氧化试验表明,其清除·OH和DPPH自由基的IC_(50)值分别为15.43和18.38 mg/m L,是一种优良的抗氧化多肽,具有广阔的市场前景。     

核桃雄花多肽酶解法制备工艺

为优化核桃雄花多肽酶解法制备工艺，该试验以响应面法对核桃雄花多肽制备工艺进行研究。对中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和风味蛋白酶进行酶种类筛选及复配，以多肽得率为指标，通过单因素试验及响应面法研究复合酶添加总量、酶解时间、酶解温度、液料比对核桃雄花多肽得率的影响。结果表明，影响核桃雄花蛋白的多肽得率的因素顺序依次为酶解温度>酶解时间>复合酶添加总量>液料比。核桃雄花的最优酶解工艺为液料比8∶1(mL/g)、复合酶添加总量51 500 U/g（木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶质量比为25∶6∶20）、酶解温度45℃、酶解时间3.0 h，实际多肽得率达到30.00%。     

红仁核桃多肽的制备工艺优化及降血脂功能研究

为对红仁核桃的精深加工及其保健功能提供参考,以红仁核桃分离蛋白为原料对其进行酶解制备红仁核桃多肽,采用单因素试验和正交试验优化酶解工艺条件,并经超滤分离得到3个组分的红仁核桃多肽,测定其多肽含量、胰脂肪酶抑制率和胆固醇胶束溶解度抑制率。以高血脂SD大鼠为模型,分别以活性最高的红仁核桃多肽的低、中、高剂量（200、400、800 mg/kg）饲喂大鼠28 d,测定大鼠体质量、脏器质量和血清指标,并进行组织切片观察。结果表明：红仁核桃多肽制备的最佳条件为酶解pH 9.0、底物质量分数4.0%、酶加入量（以反应体系总质量计）4.0%、酶解温度55 ℃,在此条件下水解度达到6.96%;分子质量小于3 kDa的组分活性最高;用红仁核桃多肽灌胃SD大鼠后能显著减缓大鼠体质量及肝脏、肾脏和附睾脂肪组织质量的增加（p<0.05）,显著或极显著降低大鼠血清总胆固醇含量、甘油三酯含量、低密度脂蛋白胆固醇含量、动脉粥样硬化指数,升高高密度脂蛋白胆固醇含量（p<0.05,p<0.01）;组织切片观察结果显示仁核桃多肽干预能抑制脂肪组织的生长和积累。红仁核桃分离蛋白酶解产物多肽具有较好的降血脂功能。     

水酶法联产核桃油和核桃多肽工艺优化及油脂脂肪酸分析

为提高核桃的综合利用率,优化了水酶法联产核桃油和核桃多肽的工艺条件,并分析了油脂的脂肪酸组成。通过比较4种不同的蛋白酶与纤维素酶复配对核桃提油率和多肽产量的影响,确定最佳酶组合;在此基础上,通过单因素和L₁₈（35）正交试验研究了pH、酶解温度、酶解时间、料液比和加酶量对核桃提油率以及多肽产量的影响,得出最佳工艺条件;利用气相色谱技术分析了核桃油的脂肪酸组成。结果表明,木瓜蛋白酶与纤维素酶复配（2:1,w/w）为最佳酶组合;水酶法制备核桃油和核桃多肽的最佳联产工艺条件为:加酶量3.0%,料液比1:5（g/mL）,pH5,时间3.0 h,温度60 ℃;在此工艺条件下,核桃提油率可达53.37%,多肽产量为4.01 mg/g。气相色谱测定结果表明,核桃油中共检测出5种脂肪酸,分别为亚油酸（62.26%）、油酸（18.64%）、α-亚麻酸（10.57%）、棕榈酸（6.00%）、硬脂酸（2.53%）;核桃油以不饱和脂肪酸为主,其总含量高达91.47%,其中多不饱和脂肪酸含量为72.83%,单不饱和脂肪酸含量为18.64%。该工艺可为水酶法联产核桃油和核桃多肽的产业化应用提供参考。     

核桃粕酶解工艺研究

以核桃粕为原料,用复合蛋白酶与风味蛋白酶水解制备核桃多肽,对酶解工艺中的多种影响因素、工艺参数进行了研究,探索出了酶法水解核桃粕的最佳工艺参数。     

响应面法优化核桃降压肽的酶解工艺研究

本研究以低温脱脂核桃粕为原料,采用碱溶酸沉提蛋白后,分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶制备核桃多肽,以血管紧张素转化酶(Angiotensin-I-Converting Enzyme,ACE)抑制率和水解度为指标,选出酶解效果最好的酶,并且对其底物质量浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和p H进行单因素实验,在此基础上采用响应面实验优化其制备核桃降压肽的最佳水解工艺。结果表明:在底物质量浓度30g/L、加酶量8000U/g、酶解温度57℃和p H8.6的条件下水解3h,ACE抑制率可达64.32%,此时酶解液的水解度为21.57%。     

核桃蛋白制备工艺研究

以提高核桃蛋白产品的附加值为目的,探索核桃蛋白制备工艺。利用单因素实验和正交实验分别对水酶法结合超声法制备核桃蛋白工艺和糖化酶处理纯化核桃蛋白工艺条件进行优化。结果表明:核桃蛋白的最佳制备工艺条件为料液比1∶20、酶解时间2.0 h、加酶量2.0%、温度50℃、p H9.0,在此条件下核桃蛋白得率为78.16%,蛋白质含量为82.53%;核桃蛋白的最佳纯化工艺条件为酶解温度50℃、pH 4.5、酶解时间140 min、加酶量0.4%,在此条件下,核桃蛋白纯度为94.16%。     

核桃多肽生物活性研究进展

核桃经压榨制油后的副产物饼粕,常用于饲料或丢弃,附加值极低。核桃饼粕富含高达50%的蛋白质,可进行深加工利用。为了促进核桃饼粕的综合利用,综述了核桃多肽的制备工艺及其生物活性。以核桃饼为原料,采用碱溶酸沉法制备核桃蛋白,再进一步用蛋白酶酶解获得核桃多肽。核桃多肽具有抗氧化、抗肿瘤、降血压、健脑、免疫调节等多种生物活性。     

酶解小球藻蛋白制备多肽的工艺研究

以钦州湾小球藻为原料,通过单因素和正交试验探讨酶解法制备多肽的最佳工艺。实验结果表明:酶解小球藻蛋白制备多肽的最佳工艺条件为:pH 6.5,酶解温度30℃,酶解时间20 min,料液比1∶100 g/mL。此时多肽得率为15.538%±0.2%。     

响应面优化酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺

为优化碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化活性肽的工艺条件,考察酶解条件对酶解产物的抗氧化活性的影响。以羟基自由基的清除率、超氧阴离子自由基的清除率、还原能力为考察指标,使用响应面分析法,研究温度、pH值、底物浓度和酶添加量对制备抗氧化活性肽工艺的影响。经过优化得出最优酶解条件为:温度51℃、pH值8.13、底物浓度3.16%、酶添加量3.30%,在此最优条件下核桃多肽对羟基自由基的清除率为55.93%、对超氧阴离子自由基的清除率为47.85%、还原能力为55.34%。在10mg/mL的浓度下,核桃多肽的还原能力是VC的55.3%,对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别是VC的93.8%和52.2%。     

发芽鹰嘴豆多肽/沙棘复合饮料配方优化

以发芽鹰嘴豆蛋白为原料制备发芽鹰嘴豆多肽,通过单因素和响应面试验,优化酶解发芽鹰嘴豆蛋白制备发芽鹰嘴豆多肽的最佳工艺、发芽鹰嘴豆多肽复合饮料的配方并分析发芽鹰嘴豆多肽/沙棘复合饮料的抗氧化活性。结果表明,酶解发芽鹰嘴豆蛋白制备发芽鹰嘴豆多肽的最佳工艺条件为底物浓度1%,加酶量12 000 U/g,酶解时间1.5 h。响应面法优化分析该饮料的最佳配方参数为可溶性固形物含量9.0%,多肽添加量25.0%,沙棘浓缩汁添加量2.0%,饮料对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为95.31%、94.53%。