小麦面筋蛋白水解物及其肽美拉德反应中间体的水相制备

利用蛋白酶对小麦面筋蛋白进行可控酶解制备最适美拉德反应前体肽。以水解度和蛋白溶出率为指标,采用双酶分步水解法,并通过偏最小二乘回归分析法确定了小麦面筋蛋白肽的制备工艺为:复合蛋白酶Ⅰ添加量2 000U/g底物,酶解时间3h;氨肽酶添加量400U/g底物,酶解时间2h;料液质量比1∶12。酶解液主要成分为小分子肽,酶解液中游离氨基酸占总氨基酸的5.59%,而肽结合氨基酸占总氨基酸的94.41%,相对分子质量1 000的组分占92.83%。以此酶解液和木糖为原料,制备小麦面筋蛋白肽—木糖美拉德反应中间体的条件为糖肽比10%,初始pH 7.5,反应温度70℃,反应时间120min。     

小麦面筋蛋白酶解特性研究

采用风味蛋白酶对小麦面筋蛋白进行深度水解,通过单因素实验,分析了底物浓度、温度、pH、酶用量、反应时间对水解度和蛋白质提取率的影响,并通过正交实验确定制备酶改性小麦面筋蛋白的最佳工艺参数为:底物浓度5%,T=50℃,pH6.5,酶用量=80LAPU/g,水解时间7h。反应最终可得水解度和蛋白质提取率均很高,且没有苦味的植物蛋白水解液,其中酶解液的水解度可达28.03%,蛋白质提取率可达52%。     

碱性蛋白酶降解小麦面筋蛋白制备抗氧化产物的工艺优化

以DPPH自由基清除率为指标,采用碱性蛋白酶降解小麦面筋蛋白,考察了酶解温度、pH值、酶解时间以及底物量对小麦面筋蛋白酶解产物抗氧化活性的影响,在正交试验的基础上,得到碱性蛋白酶解小麦面筋蛋白的最佳工艺条件为:酶解温度50℃,pH 8.0,酶解时间25 min,底物量5.0 g.在此条件下小麦面筋蛋白酶解液的DPPH自由基清除率可达70.41%.     

核桃粕中多肽的酶法制备工艺

探索生物酶法水解核桃蛋白制备核桃多肽的工艺。以酶解蛋白的水解度和氮溶指数作为考察指标,单因素筛选核桃蛋白水解酶、反应底物的液料比、酶解时间等条件,优化酶水解核桃蛋白及制备核桃多肽的提取的工艺参数。选用胰蛋白酶作为核桃蛋白的水解酶,酶解条件为:pH 7.0,温度45℃,液料比10∶1 (mL/g),酶解时间240 min,添加量4 000 U/g。该条件下改性后的核桃蛋白氮溶指数为69.61%,水解度为39.31%,提取的多肽分子量小于1 450 Da的含量为36.33%。基于酶水解法,此次试验的提取工艺合理可行,为核桃多肽的提取提供了理论依据。     

小麦面筋蛋白盐酸脱酰胺工艺优化及其酶解敏感性

文以小麦面筋蛋白为原料,优化了盐酸对小麦面筋蛋白的脱酰胺工艺,比较了最佳脱酰胺工艺下的小麦面筋蛋白在胰酶、风味蛋白酶和碱性蛋白酶酶解过程中蛋白回收率和水解度的变化,并对其酶解36 h酶解液的自由基吸收能力(ORAC)抗氧化特性进行分析评价。研究结果表明,盐酸脱酰胺的工艺条件是:小麦面筋蛋白浓度为24%,0.30 mol/L的HCl,65℃,24 h脱酰胺;在该工艺条件下,胰酶酶解液蛋白回收率和水解度最高,酶解效果最好;高脱酰胺程度小麦面筋蛋白在胰酶酶解36h后酶解液的蛋白回收率和水解度高于低脱酰胺程度的酶解液;ORAC抗氧化特性分析表明高脱酰胺程度小麦面筋蛋白酶解液的ORAC值高于低脱酰胺程度的酶解液,其ORAC值最高为(689.67±10.22)μmol Trolox/g。     

酶解十二烷基硫酸钠预处理面筋蛋白工艺优化

为提高小麦面筋蛋白的酶解效率,采用碱性蛋白酶酶解十二烷基硫酸钠(SDS)预处理的小麦面筋蛋白,以水解度(DH)、多肽得率为指标,研究酶解时间、SDS添加量、底物浓度、酶浓度、pH对酶解效率的影响.在单因素试验的基础上进行L9(34)正交试验,结果表明:SDS能显著提高酶解效率,酶解小麦面筋蛋白制备多肽的最优工艺条件为:酶解时间4h,SDS添加量4 mg/mL,底物浓度8 g/100 mL,酶浓度9 mg/mL,此时,DH、多肽得率分别为12.36％、57.24％.     

复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽及其抗氧化活性研究

以小麦面筋蛋白粉为原料,采用复合酶法制备小麦面筋蛋白多肽,以小麦面筋蛋白酶解液的水解度(DH)、DPPH·清除率及Fe3+还原力为指标,对酶比例(碱性蛋白酶∶小麦蛋白水解专用酶)、反应时间、反应温度及反应pH四种因素各取3个水平,进行L9(34)正交试验,确定最优的制备工艺条件。最优工艺条件如下:酶比例为2∶1,反应时间为2 h,反应温度为50℃,反应pH 8.5。在此优化条件下进行验证实验,测得酶解液的DH为29.9%,DPPH·清除率为89.9%,Fe3+还原力为0.150。     

Protex-6L碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白的工艺研究

选用Protex-6L蛋白酶对绿豆分离蛋白进行酶法水解生成肽和氨基酸。以水解度为考察指标,对其酶解工艺进行优化。基于单因素实验,考察了酶解参数:pH、酶解温度、底物浓度、加酶量、酶解时间等对酶解的影响,利用designexpert软件设计响应面对酶解条件进行优化分析,并在最优条件下通过SephadexG-75分析水解产物的分子量分布。结果表明:pH8.85、酶解温度57.34℃、底物质量分数7.00%、加酶量6884.36U/g、酶解时间4.19h,此条件下的绿豆分离蛋白的水解度(DH)为36.60%。水解得到的小肽分子量大部分都小于4000u。     

酸枣仁ACE抑制肽酶解工艺优化

本试验以脱脂后的酸枣仁渣通过碱溶酸沉法提取得到的酸枣仁蛋白为研究对象,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和水解度为指标,筛选复合酶种类,采用响应面分析法,以中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、pH、底物浓度、酶解温度、酶解时间为试验因素,优化酸枣仁ACE抑制肽最佳酶解工艺参数。结果表明:筛选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶作为复合酶,最适酶添加量确定为6000 U/g,5个因素对ACE抑制率和水解度的影响由大到小的顺序为:酶解温度、酶解时间、pH、中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、底物浓度。通过拟合方程分析,得到酸枣仁ACE抑制肽酶解的最佳工艺条件为:中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例为2.1:1、酶解温度为54 ℃,底物浓度为3.1%,pH为7.5,酶解时间为62 min。在此条件下,复合酶解酸枣仁蛋白酶解液的实际ACE抑制率和水解度分别为（79.46%±0.49%）和（31.45%±0.85%）,与理论值接近。制备得到酸枣仁ACE抑制肽与阳性对照组卡托普利对比,酸枣仁ACE抑制肽的ACE抑制率大小为（79.46%±0.49%）,与卡托普利的ACE抑制率偏差为（19.28%±0.12%）,证明酸枣仁ACE抑制肽具有显著降压效果。本研究证明了酸枣仁蛋白通过酶解有效得到ACE抑制肽并优化其酶解工艺,旨在为酸枣仁渣废物再利用提供参考方向和理论依据。     

calase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子肽的工艺研究

以绿豆为原料,用Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子多肽。采用单因素及多因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中绿豆分离蛋白预处理、料液比、酶解温度、加酶量、酶解时间等对小肽得率的影响,测定水解产物的功能特性,并用液质联用技术（LC-MS）考察酶解得到的小肽的分子量分布范围。结果表明：绿豆分离蛋白预处理条件为95℃处理20rain,酶解最佳条件为：65℃、pH8．5、底物浓度9％、加酶量6000U／g、酶解240min,水解度可达35．86％。经液质联用（HPLC-MS）分析证明水解产物的分子量集中在1000u以下,绿豆分离蛋白各功能特性得到很好地改善,表明该酶对绿豆分离蛋白水解效果良好,完全能达到制备多肽的水解度要求。     

基于深度酶解花生蛋白制备增咸酶解液的工艺优化

摘 要：目的 基于深度酶解花生蛋白制备增咸酶解液，并对其最佳制备工艺进行探究。方法 采用复合酶分步酶解法制备花生蛋白增咸酶解液，以单因素实验和响应面法确定最佳酶解条件，并通过对酶解产物的相对分子量分布、氨基酸含量、游离氨基酸含量和电子舌进行分析，解析酶解产物的增咸特性。结果 花生蛋白增咸酶解液的最佳工艺参数为：花生蛋白混合料液（料液比1:10，g:mL），95°C下热处理20 min，调节pH 6.5，木瓜蛋白酶加酶量：3020 U/g底物，55°C酶解2.8 h，风味蛋白酶加酶量：610 U/g底物，55°C继续酶解3.8 h。在此条件下花生蛋白水解度高达16.65%。经感官评价和电子舌分析结果表明：当0.5%（m/m）的花生蛋白酶解物加入到0.5%（m/m） NaCl溶液时，咸味增强率可达76.21%。结论 经深度酶解作用后，酶解产物分子量均在3000 Da以下，同时鲜味氨基酸占比较高，赋予酶解产物增咸的呈味特性，此研究为花生蛋白在减盐食品的应用提供了理论依据。     

谷朊粉酶解条件的优化及其抗氧化活性的研究

以溶解性为指标,采用单酶(Alcalase 2.4 L)和双酶(Alcalase 2.4 L+Flavourzyme 500 MG)2种方法水解谷朊粉,在单因素试验的基础上通过正交试验,优化了单酶和双酶水解的最佳条件,并分析了最优酶解条件下得到的2种产物的抗氧化活性、相对分子质量分布及其氨基酸组成。结果表明,单酶和双酶水解物的最大溶解性分别达到了61.38%和82.21%。水解物质量浓度为3.0 mg/m L时,单酶水解物的还原力、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别达到0.81、71.82%、56.83%和70.82%,而双酶水解物相应的指标分别达到1.01、85.33%、74.84%和84.33%。结果表明,双酶水解不仅能提高谷朊粉的溶解性,而且也能明显提高其抗氧化活性。双酶水解物中小分子肽(分子质量<1 500 u)和疏水性氨基酸的质量分数分别达到61.63%和33.74%,均高于单酶水解物,表明谷朊粉酶解物的抗氧化活性与小分子肽含量、疏水性氨基酸呈现正相关。     

以淘汰蛋鸡为原料利用蛋白酶解技术制备咸味增强肽

以淘汰蛋鸡为研究对象,利用木瓜蛋白酶制备咸味增强肽,通过单因素实验和正交实验优化最佳制备工艺条件。采用量值估计法评定鸡肉蛋白酶解产物的咸味增强作用,利用电子舌分析样品间滋味差异。正交实验极差分析结果表明,制备咸味增强肽的最佳酶解条件为:酶解时间4 h,酶解温度50℃,加酶量为鸡肉质量的0.2%,肉水比1∶2(w/w);方差分析结果表明,酶解时间、加酶量、肉水比以及时间和加酶量的交互作用对水解度有显著影响(P<0.05);酶解时间对酶解产物的咸味增强作用有显著影响(P<0.05)。电子舌输出信号值主成分分析结果表明,27组样品间的咸味存在差异,其主要影响因素为酶解时间。研究表明,淘汰蛋鸡蛋白酶解物能够将50 mmol/L NaCl溶液的咸味强度提升26.2%,可用于开发兼具调味和营养功能的调味品。     

响应面优化冰岛刺参内脏团抗氧化肽制备工艺及其组成分析

以冰岛刺参内脏团蛋白为原料,利用复合蛋白酶酶解制备抗氧化肽。在单因素实验基础上,通过响应面法优化酶解工艺条件,并分析其抗氧化活性、分子量分布和氨基酸组成。结果表明,最佳工艺条件为底物质量分数4.4%,加酶量4887 U/g,pH7.0,酶解温度56 ℃,酶解时间4.2 h,在该条件下,2 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率可达89.18%±0.11%,0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由基清除率和Fe2+螯合率分别为68.11%±0.12%、72.59%±0.08%,1.5 mg/mL酶解产物的羟基自由基清除率和还原力分别为71.86%±0.09%、0.7473±0.0105;分子量分布和氨基酸分析表明,冰岛刺参内脏团抗氧化肽中分子量低于1000 Da的肽占94.26%,富含酸性氨基酸和疏水性氨基酸,具有较高的抗氧化活性和营养价值。该研究为冰岛刺参深加工产业的发展提供了技术参考。     

胰蛋白酶水解谷朊粉制备多肽的工艺优化

为提高谷朊粉蛋白的加工性能及功能性质,考察了胰蛋白酶水解谷朊粉蛋白制备水溶性多肽的工艺。采用单因素及响应面试验法对影响谷朊粉蛋白酶解工艺的多个因素进行了分析,通过试验优化确定了谷朊粉蛋白适宜的酶解工艺条件为：谷朊粉蛋白质量浓度3 g/100 mL,加酶量为4 056 U/g,pH 11,温度48 ℃,时间为4 h。在优化的工艺条件下,谷朊粉蛋白的水解度可以达到8.03%,水溶性多肽得率为64.2%。试验结果表明,利用胰蛋白酶的水解作用将谷朊粉蛋白转化为水溶性的多肽具有可行性。     

酶解法制备条浒苔抗氧化肽工艺优化及其消化稳定性研究

本研究旨在优化中性蛋白酶水解条浒苔蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,并对水解物的消化稳定性进行表征。以DPPH自由基清除率和水解度(DH)为指标,在单因素实验的基础上采用响应面分析法优化条浒苔抗氧化肽的制备工艺。通过三级膜分离系统将酶解物分离成不同相对分子质量的三个组分,采用体外模拟消化试验测试不同相对分子质量范围组分的消化稳定性。结果表明最佳酶解条件为:温度47℃、pH7.4、加酶量3300 U/g pro、时间3.3 h、固液比1:20 g/mL,在此条件下酶解物的DPPH清除率为84.33%±1.78%,模型预测值为85.53%,经检验,实测值与预测值无显著差异(P=0.444),模型可靠;相对分子质量小于10 kDa的两个组分具有较强的抗氧化活性和消化稳定性,大于10 kDa的组分抗氧化活性明显较低,经过消化酶消化后抗氧化性显著下降。条浒苔蛋白质经中性蛋白酶水解后可获得具有抗氧化活性和消化稳定性的蛋白肽,工艺模型可靠,水解物在食品中具有潜在应用价值。     

响应面法优化紫贻贝鲜味肽酶法制备工艺

为了优化酶法水解紫贻贝制备鲜味肽工艺,提高紫贻贝的附加值和开发其应用潜力。本文以紫贻贝肉为原料,水解度和感官评分为指标,从供试的5种蛋白酶中筛选出复合蛋白酶作为水解紫贻贝肉制备鲜味肽的适宜水解酶,在此基础上,首先采取单因素实验,研究时间、pH、料液比、加酶量、温度对酶解效果的影响,确定酶解参数范围,然后采用Plackett-Burman设计筛选酶解关键影响因素,再通过响应面分析法优化酶解工艺参数,结果表明:关键影响因素为pH、加酶量、温度、时间,最优水解条件为时间3.6 h、pH 6.3、加酶量1120 U/g pro、温度54 ℃,料液比1:2 g/mL。在此条件下水解度可达44.52% ± 0.66%,感官综合评分可达5.62 ± 0.12分,T检验表明实测值与预测值无显著差异（P>0.05）。酶解液经膜分离系统分成3种组分,鲜味肽主要集中在相对分子质量小于3 kDa的组分中。     

酶法制备大豆肽的相对分子量分布及降压作用研究

目的:为了研究双酶复合酶解大豆分离蛋白制备大豆肽的相对分子量分布及活性片段对实验性高血压大鼠的降压效果。方法:通过单因素实验优选,采取正交实验优化复合酶的酶解工艺,以酶解液对血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为指标优选最佳工艺;通过超滤、纳滤后得到最佳分子量片段,应用左硝基精氨酸(L-NNA)诱导大鼠高血压模型,分别给予不同剂量的活性片段进行实验。结果:双酶复合酶解的最佳条件为:在料液比为1:20 g/mL的情况下,酶解温度50℃,酶底比3.0%,酶解pH7.0条件下先用菠萝蛋白酶酶解2 h后,再以酶底比4.0%加入胰蛋白酶,控制温度为40℃、酶解pH为8.0条件下酶解4 h,大豆分离蛋白的水解度35.31%。经过高效液相对酶解液的相对分子量分布得出,大豆分离蛋白原液含有的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间在5000~1.0×105 Da,在双酶复合酶解下,酶解液的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间均在500~4000 Da;通过超滤得出最佳活性片段为1000~3000 Da,药理实验表明,与模型对照组相比各组血压均有降低,且大豆肽剂量组有显著性差异(p<0.05);其中大豆肽高剂量组和卡托普利组相当。结论:双酶复合酶解制备的大豆肽相对分子量较小,活性片段对高血压大鼠模型降压作用显著。