大蒜多酚氧化酶特性的研究

本实验以新鲜大蒜为材料,对大蒜组织中多酚氧化酶(PPO)的特性进行了研究。结果表明:大蒜多酚氧化酶最适反应pH为7.0;最适反应温度为40℃,在30～50℃活性较高;耐热性表明,在80℃、90s和90℃、60s条件下酶失活;以邻苯二酚为底物时,Km=0.0577mol/L,Vmax=192.31U;在选定的浓度范围内抑制剂对PPO的抑制效果由强到弱依次为:NaHSO3>L-cys>柠檬酸>EDTA-Na2。     

槟榔芋多酚氧化酶的酶学特性研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究p H、温度、底物浓度对槟榔芋多酚氧化酶(PPO)活性的影响,建立相应的酶促褐变反应动力学方程,并探讨抗坏血酸、L-半胱氨酸、甘氨酸、尿素、Cu Cl2对PPO活性的影响。研究结果表明,槟榔芋PPO的最适p H为6.5;最适温度为35℃;在20℃和30℃时在60 min之内槟榔芋PPO保持较稳定的活性,30℃~60℃处理破坏PPO部分活性,70℃加热10 min PPO活性接近零;在最适作用条件下,槟榔芋PPO的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,且相应动力学参数为Km=54.05 mmol·L-1,Vmax=588.24 U·min-1。抗坏血酸、L-半胱氨酸可抑制槟榔芋PPO活性,当它们浓度分别为2.5 mmol/L和6 mmol/L时,可有效抑制槟榔芋PPO活性,而甘氨酸对槟榔芋PPO活性无抑制作用;尿素、Cu Cl2可增强槟榔芋PPO活性,当它们浓度分别为150 mmol/L和1 mmol/L时,可明显提高槟榔芋PPO活性。     

菊芋多酚氧化酶的酶学特性研究

采用0.1mol/L柠檬酸缓冲溶液匀浆法从菊芋中提取多酚氧化酶(PPO),并对菊芋中多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。实验结果表明,以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为7.4,最适温度为20℃,Km值为11.11mmol/L,Vm值为0.536OD415/min,90℃热处理2min可完全钝化PPO的活性,0.40g/L的抗坏血酸、5.0mmol/L的亚硫酸氢钠能有效抑制PPO的酶活性。     

荔枝壳中多酚氧化酶活性研究

本文对荔枝壳中多酚氧化酶(PPO)的活性及不同抑制剂的抑制效果进行研究。结果表明:荔枝壳多酚氧化酶的最佳底物浓度为0.04mol/L,最适pH为7.0,最适温度为40℃;柠檬酸、抗坏血酸、硫代硫酸钠对PPO活性表现出较好的抑制效果,三种抑制剂联合作用的最佳条件为0.01mmol/L的柠檬酸+0.04mmol/L的抗坏血酸+0.004mmol/L的硫代硫酸钠,PPO活性的抑制率达85.8%。     

抑制剂对杏多酚氧化酶抑制作用

使用冷丙酮分别从黄金杏和晚红杏中提取多酚氧化酶(PPO),以邻苯二酚为底物,利用分光光度计法研究几种抑制剂在不同浓度下对2种杏PPO的抑制作用及酶促反应动力学曲线。结果表明, 2种杏最适波长均为410nm。以邻苯二酚为底物, 2种杏多酚氧化酶的酶促褐变反应均符合米氏方程,晚红杏、黄金杏PPO的动力学参数米氏常数分别为0.042 mol/L和0.114 mol/L。V_(max)分别为100 U/min和167 U/min。抑制剂对2种杏多酚氧化酶的抑制作用存在一定差异。对黄金杏PPO抑制作用:抗坏血酸(40 mmol/L)柠檬酸(10 mmol/L)L-半胱氨酸(10mmol/L)亚硫酸氢钠(10 mmol/L)。对晚红杏PPO抑制作用:亚硫酸氢钠(10 mmol/L)柠檬酸(10 mmol/L)抗坏血酸(40 mmol/L)L-半胱氨酸(10 mmol/L), EDTA-2Na对2种杏PPO抑制作用均较差。     

涩柿贮藏过程中PPO及褐变控制

实验以新鲜的柿子为主要原料,采用测定吸光值的变化,研究了柿果中多酚氧化酶(PPO)活性的最适条件和抑制剂、烫漂温度和时间对柿果中多酚氧化酶(PPO)活性及褐变的影响。结果表明:柿子中的多酚氧化酶的最适温度是19℃,最适pH为6．5,最适底物浓度为12mmol/L。用0．1%亚硫酸钠+0．3%植酸和100℃+120s处理能有效的抑制柿果中PPO的活性,褐变速度明显减慢。     

曹州木瓜多酚氧化酶的酶学特性

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法对曹州木瓜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性进行了研究。结果表明:曹州木瓜PPO的最适pH为5.0,最适温度为30℃;PPO在60⁹0℃内的热失活曲线具有双相特征,活化能Ea=112.95 kJ/mol;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,且相应动力学参数为K m=6.92 mmol/L,V max=769.23 U;5种抑制剂对PPO的抑制效果从大到小依次为:亚硫酸氢钠>抗坏血酸(Vc)>L-半胱氨酸(Lcys)>柠檬酸>EDTA-2Na;Na+和K+对PPO活性的影响不明显,Al3+、Ba2+、Cu2+对PPO具有抑制作用,Mg2+、Mn2+、Ca2+在低浓度(1 mmol/L)时对PPO具有激活作用,高浓度(10 mmol/L)时具有抑制作用。     

山楂多酚氧化酶的酶学特性研究

研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。     

圆蘑菇多酚氧化酶的特性研究

采用0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从圆蘑菇中提取多酚氧化酶(PPO),并对该多酚氧化酶的酶学特性进行研究.实验结果表明,以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH为6.4,最适温度为30℃,Km值为0.032 3 mol/L,Vmax值为0.0164 U/min,100 ℃热处理1.5 min可完全钝化PPO的活力,10 mmol/L的EDTA、L-半胱氨酸或柠檬酸亚锡二钠能有效抑制PPO活力.     

可溶态和膜结合态马铃薯多酚氧化酶的性质对比

以大西洋马铃薯为原料,制备可溶态(s PPO)和膜结合态(mPPO)多酚氧化酶,并对两种粗酶液的酶学性质进行研究。结果表明,s PPO最适反应温度为35℃,最适p H值为7,mPPO最适反应温度为30℃,最适pH值为7。以焦性没食子酸、邻苯二酚为底物时,sPPO的米氏常数(K_m)分别为10.04 mmol/L和24.00 mmol/L,最大反应速度(V_(max))值分别为443 U/(mL·min)和965U/(m L·min),mPPO的米氏常数(K_m)分别为4.98 mmol/L和48.04 mmol/L,最大反应速度(V_(max))值分别为299 U/(mL·min)和912U/(m L·min),且对焦性没食子酸的催化效果优于邻苯二酚。6种抑制剂对比发现,Na_2SO_3对sPPO活性的抑制效果最好,Vc对mPPO活性的抑制效果最好。sPPO和mPPO的酶学特性有一定的差异,对马铃薯制品加工过程中酶促褐变的控制具有指导意义。     

西葫芦多酚氧化酶酶学特性研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法对西葫芦多酚氧化酶(PPO)的酶学特性及不同抑制剂对多酚氧化酶活性的影响进行研究。结果表明,西葫芦多酚氧化酶最适pH为6.6,最适温度为35℃,90℃处理5min可使该酶失活。多酚氧化酶催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为Km=0.0417mol/L,Vmax=208.33U。四种抑制剂对PPO的抑制效果由强到弱依次为:亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>抗坏血酸>柠檬酸。     

香蕉皮多酚氧化酶和过氧化物酶特性的研究

分别以邻苯二酚、愈创木酚为底物,采用分光光度计测定氧化产物的方法对香蕉皮多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)的性质进行研究。结果表明,PPO最适温度为30℃、最适pH5.5、Km=22.42mmol/L、Vmax=0.027OD420/min,75℃水浴处理5min基本完全失活,100℃水浴处理20s可钝化PPO活性,并且香蕉皮PPO有同工酶;香蕉皮过氧化物酶(POD)的最适pH6.0、最适温度30℃,其在80℃下处理5min后基本失活,在沸水浴25s后酶被钝化。     

金银花叶多酚氧化酶的酶学特性

对金银花叶多酚氧化酶(PPO)的酶学特性进行研究。以新鲜金银花叶片为原料,采用溶剂法从中提取多酚氧化酶粗液,研究不同的温度、pH值、底物浓度、抑制剂等因素对PPO活性的影响,建立酶促褐变动力学方程。研究结果表明,金银花叶PPO的最适温度45℃,最适pH6.5,安全、经济的褐变抑制剂柠檬酸;当以邻苯二酚为底物时,金银花叶PPO活性与底物浓度关系符合米氏方程的酶促反应动力学规律,最大反应速度Vmax=313U/min,Km=0.0197mol/L。     

砀山酥梨多酚氧化酶酶学特性及抑制效应的研究

多酚氧化酶是酶促褐变的关键酶,其特性与对其抑制效应研究一直是果蔬酶促褐变生理生化研究的重要内容,本试验以邻苯二酚为底物,采用分光光度法对砀山梨多酚氧化酶的酶学特性及不同抑制剂对多酚氧化酶活性的影响进行了研究。结果表明：砀山梨PPO的最适pH为4.5,最适温度为34℃;短时间高温能显著抑制PPO活性;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,该酶促反应的最大速率为178.57U/min,酶反应速度为最大反应速度1/2时的底物浓度为0.125mol/L;柠檬酸、L-半胱氨酸、抗坏血酸,亚硫酸氢钠较柠檬酸能较好地抑制PPO活性,随着浓度的升高,抑制效应逐渐增强,但综合研究表明L-半胱氨酸抑制效应较好。     

蒲菜中多酚氧化酶部分酶学性质的研究

对楚州区蒲菜多酚氧化酶(PPO)的部分酶学性质进行了研究,结果表明:蒲菜中多酚氧化酶的最适pH范围为5.6~6.5,当体系pH>6.6或者pH<4.4时,能有效降低PPO的活性。在30~50℃下PPO具有较高活性,其最适温度为30℃左右。PPO的热稳定性较强,95℃加热2min,酶活丧失80%左右。氯化钠、抗坏血酸、亚硫酸氢钠、柠檬酸等对PPO都有抑制作用。     

蛋白交联中多酚氧化酶的酶源筛选及酶学性质研究

从多种植物和真菌中筛选出多酚氧化酶(PPO)活力高的原料,并对其酶学性质进行研究,以利于其在蛋白交联中的应用。双孢蘑菇和茄子中PPO 酶活相对较高,达到11004U/g 和9376U/g。双孢蘑菇PPO 和茄子PPO 的最适温度和pH 值均分别为20℃和7.0;在温度较高时,茄子PPO 比双孢蘑菇PPO 稳定性更好。Zn2+、Mn2+、Ag+对双孢蘑菇PPO 和茄子PPO 活力表现明显的抑制作用,Cu2+ 对双孢蘑菇PPO 活力表现明显的促进作用,而对茄子PPO 却有很强的抑制作用。双孢蘑菇PPO 和茄子PPO 的Km 和Vmax 分别为5.5mmol/L、1666.7U 和8.75mmol/L、2500U。     

南国梨多酚氧化酶的研究

以新鲜南国梨果实为原料,邻苯二酚为底物,采用分光光度法研究南国梨多酚氧化酶的酶学特性。结果表明:p H和温度对新鲜南国梨PPO活性有明显的影响,最适p H为6.8,新鲜南国梨PPO最适温度为40℃。进一步研究了抑制剂抗坏血酸、柠檬酸、亚硫酸氢钠、L-半胱氨酸、EDTA-2Na和各种金属盐[CuSO_4、CaCl_2、Na_2SO_4、Al(NO_3)_3、CdCl_2、HgCl_2、MnCl_2]对南国梨PPO的影响,其中0.1 mmol/L的抗坏血酸对新鲜南国梨PPO活性有明显抑制作用高达50%。南国梨PPO催化底物邻苯二酚的酶促反应动力学与米氏方程高度符合,R2=0.998,其动力学方程为1/[V]=0.002/[S]+0.019,最大反应速率Vmax为52.632 U/min,米氏常数Km为0.010 5 mol/L。     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶(PPO)的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca~(2+)和Mn~(2+)对蓝莓PPO有抑制作用,Cu~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。     

冬瓜多酚氧化酶的特性及抑制剂研究

以邻苯二酚为底物,采用'分光光度法在420 nm 处测定冬瓜多酚氧化酶(PPO)的活性,研究了不同温度和 pH 值对其活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程,探讨了抗坏血酸、亚硫酸氢钠、柠檬酸和 EDTA-2Na 4 种抑制剂对冬瓜酶促褐变的抑制效果.结果表明,冬瓜多酚氧化酶的最适温度为20℃,最适pH值为6.0;冬瓜多酚氧化酶的米氏方程符合单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数为 Kin=0.0118 mol/L,Vm=0.0586 U/min;化学抑制剂抗坏血酸、亚硫酸氢钠、柠檬酸和EDTA-2Na 对多酚氧化酶都有抑制作用,其活性分别为对照的25%、32%、62%和57%.     

板栗仁多酚氧化酶特性研究

采用分光光度法,对板栗仁多酚氧化酶(PPO)的催化特性、最适波长、最适反应时间、最适温度、最适pH值、热稳定性等性质进行了研究,同时研究了Vc、EDTA、NaCl、柠檬酸4种添加剂对板栗仁多酚氧化酶活性的影响.结果表明:板栗仁多酚氧化酶催化氧化产物的最大吸收波长为410nm,最佳反应时间为3min,最适反应温度为30℃,最适pH值为6.0,米氏常数Km＝0.0694mol/L,Vmax＝3.918OD/min.95℃水浴处理5min该酶已基本失活,其中Vc和EDTA对板栗仁多酚氧化酶酶促褐变有很好的抑制效果.