醋蛋多肽血管紧张素转化酶抑制活性的稳定性研究

研究了温度、pH、金属离子、食盐及食品中常见糖类和防腐剂对醋蛋多肽血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的影响。结果表明:醋蛋多肽的ACE抑制活性对热不稳定,对pH稳定;当金属离子浓度达到5mmol/L时,醋蛋多肽的ACE抑制活性有较明显的下降,其影响大小顺序为K+>Zn2+>Cu2+>Ca2+>Mg2+;食盐能降低醋蛋多肽的ACE抑制活性;在实验浓度范围内,葡萄糖、蔗糖、乳糖、苯甲酸和山梨酸对醋蛋多肽ACE抑制活性影响不大。     

杨梅蛋白酶解肽抗氧化及降血糖活性的稳定性研究

以杨梅蛋白酶解肽为研究对象,考察其相对分子量分布范围,并以DPPH自由基清除活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性为指标,分别研究了温度、p H、糖、防腐剂和金属离子等5个因素对杨梅蛋白酶解肽抗氧化及降血糖活性的影响。结果表明,杨梅蛋白酶解肽分子量范围在118.9~4552.2u,且杨梅蛋白酶解肽有较强的热稳定性及耐酸性,而在碱性条件下,抗氧化活性丧失较快而降血糖活性略微上升;糖类能显著增加其抗氧化活性,增加顺序为:葡萄糖乳糖蔗糖;苯甲酸和Na Cl对其抗氧化活性影响及苯甲酸对其降血糖活性影响都不显著(p0.05),而Na Cl在1.5%~2%范围内促进了降血糖活性;Cu2+和Zn2+均能降低抗氧化及降血糖活性,而Mg2+和K+对抗氧化活性影响不显著(p0.05),但Mg2+对降血糖活性有较小增强作用,K+影响不显著(p0.05)。     

不同分子量红花籽抗氧化肽稳定性研究

目的:研究不同分子量红花籽蛋白抗氧化肽活性的稳定性。方法:以脱壳红花籽粕为实验材料,经复合酶酶解分离制备抗氧化肽,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基（superoxide anion radical,O₂?·）及羟自由基（hydroxyl free radicals,·OH）清除能力为指标,探讨温度、pH、食品原辅料、金属离子及模拟胃肠消化等环境因素对不同分子量红花籽抗氧化肽活性的影响。结果:红花籽蛋白酶解物<3 kDa（SSPH-Ⅰ）、3~5 kDa（SSPH-Ⅱ）较分离前活性显著增加（P<0.05）,SSPH-Ⅲ（5~10 kDa）和SSPH-Ⅳ（>10 kDa）较分离前活性显著降低（P<0.05）,选取活性显著增加组分研究发现SSPH-Ⅰ抗氧化活性更加稳定,能在60~121 ℃高温、pH6~8弱酸弱碱条件下保持活性,各自由基清除率维持率达到90%以上,10 g/100 mL NaCl和葡萄糖、0.2 g/100 mL柠檬酸对SSPH-Ⅰ抗氧化活性有增强协同作用,各自由基清除率维持率增加至105%左右,10 g/100 mL的蔗糖和0.2 g/100 mL的防腐剂对活性影响不大,添加Cu2+、Zn2+和K+金属离子对SSPH-Ⅰ抗氧化稳定性显著下降（P<0.05）,其影响顺序为:Cu2+>Zn2+>K+>Mg2+>Ca2+,经模拟胃肠消化后活性较稳定,维持率为80%。结论:筛选得到<3 kDa红花籽蛋白抗氧化肽组分活性较高且稳定,为其工业化生产及应用提供理论依据。     

几种南海贝类酶解产物的生物活性及其分子量分布研究

对菲律宾蛤仔、波纹巴非蛤、马氏珠母贝双酶水解产物的自由基清除活性和血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性及分子量分布进行研究。结果表明：3种贝类酶解产物均具有清除羟自由基、超氧阴离子、二苯基苦基苯肼（DPPH）等自由基的活性以及ACE抑制活性;3种贝类酶解产物对超氧阴离子的清除作用均较弱;羟自由基清除活性较强的是菲律宾蛤仔酶解产物,其高活性组分的分子量在1479～851 Da之间;DPPH自由基清除活性较强的是菲律宾蛤仔酶解产物,其高活性组分的分子量在1479～851 Da之间;ACE抑制活性较强的是波纹巴非蛤酶解产物,其高活性组分的分子量在633—303 Da之间。     

具有金属螯合活性的蚕豆蛋白酶解物的制备

目的探究蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性,研究其金属螯合活性与其抗氧化活性的关系。方法分别采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对蚕豆蛋白进行酶解,并测定其水解物的抗氧化活性与金属螯合活性,选用碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白制取金属螯合肽的最适酶,以酶解产物的水解度、抗氧化活性及金属螯合活性为测定指标获得合适的水解条件。结果 3种蛋白酶的蚕豆蛋白酶解产物都有金属螯合活性和抗氧化活性,碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白的最适酶,最适酶解时间为4 h时,得到的酶解产物金属离子螯合率为88.22%,抑制羟自由基能力为220.70 U/mg,总还原力为0.03 U/mg。结论蚕豆蛋白酶解物具有一定的金属离子螯合活性与抗氧化活性,水解度对蚕豆蛋白酶解物的金属离子螯合活性及抗氧化活性有明显的影响,蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性与总还原力及抑制羟自由基能力呈现显著的正相关性,相关系数分别为0.925、0.968(P0.01)。     

泥鳅ACE抑制肽的体外活性研究

以泥鳅蛋白为原料,酶解制备具有降血压活性的短肽,研究该肽的稳定性。在加热温度≤80℃条件下加热2h,泥鳅降血压肽(<2.5ku)的ACE抑制活性没有显著变化。当2.0≤pH≤8.0时,泥鳅降血压肽的ACE抑制活性变化不显著。冷冻干燥优于喷雾干燥。Mg2+对泥鳅降压肽的降压活性起到促进作用,而Zn2+和Mn2+抑制了肽的降压活性。葡萄糖对降压肽活性的影响程度明显大于蔗糖,随着浓度的升高,其ACE抑制活性逐渐降低,褐变程度加深;氯化钠对降压活性的影响不明显。在模拟胃肠道消化体系中,胃蛋白酶的消化显著提高了产物的降压活性;胰酶的消化降低了产物的降压活性。泥鳅多肽属于底物型ACE抑制肽。     

星鳗抗氧化肽的稳定性研究

目的 研究星鳗抗氧化肽(Astroconger myriaster antioxidant peptide, CMAPⅠ)在加工贮存贮藏及胃肠消化过程中的稳定性。方法 以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性和羟自由基(hydroxyl free radicals,·OH)清除活性为指标,通过测定温度、pH值、冻融次数、紫外照射时间、不同食品辅料(NaCl、葡萄糖、苹果酸)和不同金属离子对星鳗抗氧化肽稳定性的影响,同时以体外模拟胃肠消化系统来测定其消化吸收稳定性。结果 CMAPⅠ耐热性较好,温度在60~80 ℃时DPPH自由基和OH－清除率羟自由基分别为70.8%和42.5% 。CMAPⅠ抗碱性较差,当pH为10时,清除率降低了23.5%和16.6%,在反复冷冻解冻和紫外照射下对星鳗抗氧化肽的活性基本没有产生影响。添加NaCl、葡萄糖溶液、苹果酸后,DPPH自由基和羟自由基清除率相比无添加辅料提高了6.8%和10.2%。K+和Ca2+对抗氧化活性基本不产生影响,但随着Mg2+、Cu2+、Fe3+随着金属离子浓度的增大,星鳗抗氧化肽的活性会明显降低。在体外模拟的胃道消化,、消化时间为60 min时,DPPH自由基和羟自由基清除率最高,最高清除活性分别 为81.24%和62.28%,同时,CMAPⅠ在胃中始终能表现较好的稳定性,而进一步转向肠消化后,在肠道消化300 min时,DPPH自由基和羟自由基清除率分别为69.08%、和46.18%。,肠道消化前后相比降低了12.0%和17.2%（怎么是两个数据？是胃、肠么?表述清楚）。 结论 通过研究表明星鳗抗氧化肽具有一定的抗氧化稳定性,对星鳗抗氧化肽的工业生产和应用具有着重大意义。     

玉米抗氧化肽Leu-Pro-Phe抗氧化稳定性研究

以从玉米蛋白粉中分离纯化得到的玉米抗氧肽Leu-Pro-Phe为研究对象,探讨温度、p H、食品配料、金属离子和胃肠道消化酶对Leu-Pro-Phe清除DPPH和ABTS自由基能力的影响。结果表明:玉米抗氧化肽LeuPro-Phe具有较好的热稳定性,在100℃下处理5 h仍能保持较好的自由基清除活性。Leu-Pro-Phe具有良好的耐酸、耐碱性,酸性和碱性环境均未破坏其结构,其中碱性环境有助于其清除ABTS自由基。食品配料对LeuPro-Phe的抗氧化活性影响显著,其中蔗糖、Na Cl和柠檬酸能极显著(P0.01)地提高其DPPH自由基清除活性。常见的金属离子对Leu-Pro-Phe抗氧化活性的影响不一,K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+和Cu2+均能显著(P0.05)影响LeuPro-Phe的DPPH自由基清除活性,而其ABTS自由基清除活性仅对Cu2+敏感,高浓度的Cu2+能显著(P0.05)抑制其清除活性。体外消化试验表明:Leu-Pro-Phe具有一定的抗消化能力,经胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后仍保持较高的自由基清除活性。     

龙须菜ACE抑制肽的体外稳定性和抗氧化活性研究

以龙须菜为原料,通过酶解法制备分子量<1 kDa的龙须菜蛋白,分别以冷冻干燥和喷雾干燥收集多肽组分(GLP-F、GLP-S),研究其在体外环境的活性保留率和抗氧化能力。通过血管紧张素转化酶(Angiotensin Ⅰ converting enzyme, ACE)活性抑制、总抗氧化能力、DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子清除能力等实验测定多肽抗氧化能力及体外稳定性。结果表明,通过ACE抑制活性为指标,两多肽在ACE抑制活性均有较好的IC₅₀值(0.62、0.70 mg/mL),金属离子Zn2+和Cu2+促进两个多肽ACE活性的保留,Al3+、K+、Fe3+等离子均能较好保留两多肽的ACE抑制活性,Ca2+的加入则降低了多肽的ACE抑制活性。随着NaCl浓度的升高,GLP-F和GLP-S的ACE抑制活性降低;高糖浓度下GLP-F的ACE抑制活性较好保留,GLP-S的ACE抑制活性显著增加（P<0.05）。GLP-F在强酸强碱环境下ACE抑制活性略降低5%,GLP-S的ACE抑制活性不受酸碱pH环境的影响;在低于40 ℃的温度条件下,GLP-F和GLP-S的ACE抑制活性得到保留。在模拟体外胃肠消化系统可知:GLP-F为前体型抑制肽,GLP-S为真抑制型抑制肽。?20 ℃条件下两者活性都能保持稳定,而GLP-F在4 ℃贮藏至14 d活性保留降至40.67%。体外抗氧化试验表明,GLP-S在总抗氧化能力、DPPH·、·OH和O₂?·清除能力方面均优于GLP-F。因此,GLP-F多肽体外降血压活性稳定性上更优于较GLP-S,而GLP-S在抗氧化方面效用高于GLP-F,此为龙须菜多肽开发为天然降血压肽和抗氧化肽提供理论参考。     

河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性研究

以河蚬抗氧化肽清除羟自由基的活性变化为指标,研究温度、p H、食品原料、防腐剂和不同金属离子对河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性的影响。结果表明:河蚬抗氧化肽具有较强的耐热性,加热到100℃仍能保持95%以上的活性;在酸性环境中活性保持较好,在碱性条件下丧失较快;蔗糖、Na Cl对河蚬抗氧化肽的稳定性影响不明显,而葡萄糖和山梨酸钾会明显降低河蚬抗氧化肽活性(p0.05);K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+等金属离子对河蚬抗氧化肽稳定性均有不同程度的影响,其影响大小顺序为:Cu2+Zn2+Ca2+K+Mg2+。     

Comparison of ACE inhibitory and DPPH radical scavenging activities of fish muscle hydrolysates

To utilise Atlantic salmon, Coho salmon, Alaska pollack, and southern blue whiting as components of neutraceutical food and to clarify the potential physiological function of those fishes, their muscles were hydrolysed with pepsin, pancreatin or thermolysin. Methanolic extracts of fish muscle and their hydrolysates were prepared for analysis of angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activities. Pepsin hydrolysates of all the fish samples did not increase degree of hydrolysis, extractive nitrogen content and bioactivities. Pancreatin and thermolysin improved the ACE inhibitory activity, and the activity was expressed following the peak of size exclusion chromatography (SEC). The DPPH radical scavenging activity was increased following pancreatin and thermolysin hydrolysis, but this activity was not related to the SEC result. Except for the lower DPPH radical scavenging activity of Alaska pollack pancreatin hydrolysate than those of the others, there was no significant difference in the ACE inhibitory and DPPH radical scavenging activities by fish species.     

Improvement of the ACE‐inhibitory and DPPH radical scavenging activities of soya protein hydrolysates through pepsin pretreatment

This study aimed to investigate the effect of pepsin pretreatment on the ACE‐inhibitory and DPPH radical scavenging activities of soya protein hydrolysates prepared with alcalase and protamex. The protein recovery, TCA‐soluble peptide content, surface hydrophobicity, particle size and zeta potential were evaluated. Results showed that the hydrolysates exhibited varying ACE‐inhibitory (i.e. the highest value 72.6% by alcalase and 84.3% by protamex) and DPPH radical scavenging activities (i.e. the highest value 51.9% by alcalase and 51.7% by protamex). Pepsin pretreatment could make soya proteins more susceptible for hydrolysis, and the results showed that the ACE‐inhibitory and DPPH radical scavenging activities of the resultant hydrolysates were improved. A highly significant positive correlation between ACE‐inhibitory and DPPH radical scavenging activities was observed in the alcalase hydrolysates, while no significant correlation among other treatments. The physical properties of hydrolysates, that is surface hydrophobicity, particle size and zeta potential, could influence their ACE‐inhibitory and DPPH radical scavenging activities.     

干酪乳杆菌胞壁蛋白酶的分离及水解酪蛋白产物特性

通过DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-100对干酪乳杆菌胞壁蛋白酶粗提物进行分离纯化,分离到酶比活力为12.50U/mg的CEP-1与16.67U/mg的CEP-2两种胞壁蛋白酶。CEP-1提纯倍数达到50,回收率为33.61%;CEP-2提纯倍数为66.68,回收率55.17%。对不同时间和底物浓度下CEP-1与CEP-2的α-酪蛋白和β-酪蛋白水解特性进行研究。结果显示,酪蛋白水解产物有显著的抗ACE与抗氧化活性,产生最高ACE抑制活性的水解条件为：CEP-2水解α-酪蛋白,时间6h,酶与底物质量比1:10,此时ACE抑制活性为84.66%;在酶与底物质量比1:40,水解时间4h条件下,CEP-2水解β-酪蛋白产生最佳的O2－ ·清除能力,其IC50为0.2138mg/mL。     

体外模拟消化对大米谷蛋白结构及水解产物生物活性的影响

通过体外模拟消化,研究不同消化时间下谷蛋白结构与抗氧化和血管紧张素转换酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）抑制活性的关系。利用内源荧光光谱和傅里叶变换红光谱测定谷蛋白水解过程结构变化。通过测定水解产物抗氧化能力和ACE抑制率表征酶解产物的活性,利用四极杆串联飞行时间质谱鉴定具有抗氧化和ACE抑制活性的组分。结果表明,谷蛋白水解度在2 h内快速增加,随后趋于平缓。水解导致谷蛋白λmax红移且荧光强度增强,α-螺旋含量显著增加、β-折叠相对含量显著降低（P＜0.05）。α-螺旋结构含量的增加降低了水解物的抗氧化能力,谷蛋白β-折叠结构含量的减少能增强水解物的ACE抑制能力。水解0.5 h抗氧化能力最强,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率的半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）为（1.113±0.015）mg/mL,·OH清除率IC50为（0.518±0.053）mg/mL、Fe2＋螯合能力IC50为（0.678±0.019）mg/mL。ACE抑制率先增加后降低,在2 h达到最高,IC50为（0.693±0.011）mg/mL。水解度的增加降低了水解物抗氧化能力,但增强了ACE抑制能力。水解物在0.5～2 h抗氧化能力和ACE抑制能力呈现负相关关系,随后抗氧化能力和ACE抑制能力均下降。水解物抗氧化肽和ACE抑制肽分子质量均小于2 kDa,筛选出以VEGGFLFIV为代表抗氧化活性多肽,且ACE抑制肽大部分N-端是疏水性氨基酸或者碱性氨基酸。因此,通过控制谷蛋白体外消化水解度,可制备最优的大米谷蛋白抗氧化或降血压相关功能性产品。     

黑蚂蚁蛋白的酶解优化及抗氧化肽的超滤膜分离

本文研究了酶量、温度、pH和时间四个因素对黑蚂蚁蛋白的碱性酶法水解的影响。通过响应面设计,以各个抗氧化活性为指标,优化了超氧自由基清除率,DPPH自由基清除率,羟基自由基清除率,还原力和亚油酸自氧化抑制作用最强的酶解工艺条件。验证实验证实方程的准确率达95%以上。采用超滤膜及离子交换色谱对酶解产物进行了分离,发现5-10 kDa和1-3 kDa组分的抗氧化能力最强,碱性肽对超氧自由基清除能力、羟基自由基清除能力、亚油酸自氧化抑制作用贡献较大,酸性肽对DPPH自由基清除能力及还原力的贡献较大。     

Bioactive properties of enzymatic hydrolysates from abdominal skin gelatin of yellowfin tuna (Thunnus albacares)

Gelatin (90.6 ± 0.1%) was optimally prepared by response surface methodology from yellowfin tuna (Thunnus albacares, YT) abdominal skin. To investigate bioactive properties of enzymatic hydrolysates from the abdominal skin gelatin (ASG), ASG was hydrolysed with alcalase, protamex, neutrase and flavourzyme as affected by hydrolysis time. Antioxidant, nitrite scavenging and angiotensin‐I converting enzyme (ACE) inhibitory activities of the hydrolysates were determined. Antioxidant activities of the hydrolysates were found through linoleic acid peroxidation inhibitory effects. Alcalase‐derived hydrolysates (AHs) were more effective than others in metal ions chelating, superoxide anion scavenging and hydroxyl radical scavenging activities (P < 0.05). AHs showed significantly stronger nitrite scavenging activities (44.4–60.7%) than others (P < 0.05). Fraction A from AH showed strong ACE inhibitory activity (IC₅₀ of 0.75 mg mL^?1). These results suggest that YT ASG and its enzymatic hydrolysates could be functional food and/or pharmaceutical ingredients with potent antioxidant, anticarcinogenic and antihypertensive benefits.     

不同蛋白酶对小麦蛋白酶解物抗氧化活性的影响

小麦蛋白是小麦淀粉加工的副产物,酶解是提高小麦蛋白溶解性和功能性的有效方式,而酶解用酶种类可能对酶解产物的功能性如抗氧化活性有一定影响。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种常用的蛋白酶分别对小麦蛋白进行酶解,并对酶解4 h后酶解物的多肽得率、分子质量分布、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率、羟自由基(·OH)清除率等反映水解程度和抗氧化能力的主要指标进行评价。结果表明,风味蛋白酶酶解物中多肽得率最高,达91.44%,且分子质量小于3 000 D的多肽含量达76.9%;酶解物质量浓度为3 mg/m L时,木瓜蛋白酶酶解物对DPPH自由基清除作用最好,清除率为65.12%(P0.01),其次是风味蛋白酶(58.43%)和碱性蛋白酶(55.29%);碱性蛋白酶酶解物对O_2~-·清除率效果最好,清除率为58.68%(P0.01),其次是风味蛋白酶(49.25%);碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解物对·OH清除效果最佳,清除率分别为59.23%和58.16%。结果说明,蛋白酶种类对小麦蛋白酶解物抗氧化活性影响显著,风味蛋白酶对提高蛋白水解程度和生成小分子质量多肽的作用明显,而碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对提高酶解产物抗氧化活性效果较好。     

花生水解蛋白液的浓缩及体外活性研究

本文对水酶法工艺中得到的花生水解蛋白采用纳滤分离技术进行浓缩,确定操作压力为0.9MPa,操作温度为35℃。经60min纳滤浓缩水解液中蛋白质浓度由30.2提高到92.1g/L,浓度提高了3.05倍。对纳滤前后的花生水解蛋白的还原能力、抗氧化能力、对·OH与DPPH的清除作用及抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性进行研究,结果表明花生水解蛋白具有相当的还原力和清除·OH与DPPH能力;具有抗Fe2+引发的卵磷脂脂质体过氧化、抑制ACE活性的功能。     

舟山海域4种低值鱼酶解蛋白亚铁螯合物自由基清除活性与抑菌活性研究

对马鲛鱼、带鱼、鳀鱼、梅童鱼碱性蛋白酶酶解蛋白亚铁螯合多肽自由基清除活性和抑菌活性进行研究,结果表明:4种低值鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽(Low value fish enzymatic hydrolysates protein ferrous chelatingpeptides,LEFP)均出现不同程度的清除羟自由基、超氧阴离子、二苯基苦基苯肼(DPPH)等自由基的活性;4种低值鱼酶解产物亚铁螯合多肽对超氧阴离子的清除作用均较弱;羟自由基清除活性较强的是梅童鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽;DPPH自由基清除活性较强的是马鲛鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽;4种低值鱼酶解产物亚铁螯合多肽对待测菌株有不同程度的抑菌作用。其中带鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽对3个被测菌株都表现出明显的抑菌活性,而马鲛鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽则没有明显的抑菌活性。     

不同处理条件对猴头菇抗氧化活性的影响

研究不同加工、烹制条件对猴头菇抗氧化活性的影响。在不同处理条件下处理猴头菇子实体,然后从清除羟自由基的能力、还原力、清除超氧阴离子自由基和清除DPPH自由基的能力4个方面测定不同处理条件对猴头菇抗氧化活性的影响。结果显示,随烘烤温度升高,清除羟自由基的能力与还原力显著升高,清除超氧阴离子自由基的能力和清除DPPH自由基的能力显著降低。微波处理对清除羟自由基基本没有影响,但能显著升高还原力、清除超氧阴离子自由基和清除DPPH自由基的能力。煮处理中,清除超氧阴离子自由基的能力、还原力和清除DPPH自由基的能力显著高于炒处理;而对于清除羟自由基,炒处理则显著高于煮处理。研究结果为猴头菇加工、烹制条件的改善提供理论依据。